[发明专利]一种莲胚拯救及后代快速生长发育的培养基和方法有效
申请号: | 201810537116.7 | 申请日: | 2018-05-30 |
公开(公告)号: | CN108849500B | 公开(公告)日: | 2020-04-24 |
发明(设计)人: | 胡中立;李晔;刁英;郑兴汶;汪超;周明全 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;A01H4/00 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 彭劲松 |
地址: | 430072 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 拯救 后代 快速 生长发育 培养基 方法 | ||
本发明公开了一种莲胚拯救及后代快速生长发育的培养基和方法,属于植物组培快繁技术领域。本发明的培养基包括胚拯救培养基和生根培养基,所述胚拯救培养基为MS+2,4‑D 2.0mg/L+6‑BA 0.5mg/L+KT 1.0mg/L+VC 80mg/L,所述生根培养基为MS+NAA 2.0mg/L+6‑BA 0.5mg/L+KT 1.0mg/L。将需要进行胚拯救的莲种子预处理后依次接种于本发明胚拯救培养基和生根培养基进行诱导培养,即可使其生长并长出根系。本发明解决了未成熟莲子无法通过常规方法进行生长、繁殖的问题,在短期内可实现组培苗健康快速繁殖生长。本发明操作简便,易普及,可实现规模化生产。
技术领域
本发明涉及植物组培快繁技术领域,尤其是涉及到一种莲胚拯救及后代快速生长发育的培养基和方法。
背景技术
莲兼具食用和观赏功能,具有极大的经济价值。莲既可无性繁殖也可有性繁殖。在有性繁殖时,莲子需完全自然成熟,表皮呈褐色,经过自然脱水,其水分含量大幅度下降,体积较先前变小。如果莲子未成熟,胚就无法自然地发芽生长。大量的花莲品种无法在自然条件下获得成熟莲子。此外,在进行莲的杂交育种时,有些杂交组合也很难得到成熟莲子。因此,急需一种有效的技术手段去拯救幼胚,保障其正常发育生长,从而为莲的遗传育种及种子繁育提供技术支撑。
植物组织培养是目前进行胚拯救并促进幼苗快速生长发育的一种有效的技术手段。通过在培养基中添加适当、适量的植物激素来促进胚成熟,进而促进其快速生长发育,获得成活植株。
因此,目前急需采用组织培养的手段,摸索出进行莲胚拯救的培养基和方法,建立莲的一种能够高效、快速的胚拯救技术体系,使得不能正常结籽的莲也可以获得后代植株。
发明内容
为了解决未成熟莲子无法通过常规方法进行有性繁殖的问题,本发明提供一种莲胚拯救及后代快速生长发育的培养基及方法,以达到从未成熟莲子获得健康后代植株的目的。
本发明提供的一种莲胚拯救及后代快速生长发育的培养基,包括胚拯救培养基和生根培养基。其中,所述胚拯救培养基含有如下含量的成分:2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)2.0mg/L、6-苄基腺嘌呤(6-BA)0.5mg/L、6-糖基氨基嘌呤(KT)1.0mg/L、抗坏血酸(VC)80mg/L;所述生根培养基包含如下含量的成分:萘乙酸(NAA)2.0mg/L、6-BA 0.5mg/L、KT 1.0mg/L。
优选的,所述胚拯救培养基和生根培养基均以MS培养基为基本培养基。
优选的,所述胚拯救培养基和生根培养基的pH值均为5.8。
优选的,所述胚拯救培养基和生根培养基还含有蔗糖30g/L、植物凝胶1.16g/L,使得培养基呈现半固体状态。
本发明提供的一种莲胚拯救及后代快速生长发育的方法,包括如下步骤:将需要进行胚拯救的莲种子预处理后接种于上述胚拯救培养基上进行诱导培养至发育出丛生芽,再转移至上述生根培养基进行诱导培养,使其生长并长出根系,成为完整试管苗。
所述方法中,将莲种子进行预处理的方法优选为:将幼果期的去壳莲子或受精8-10天的莲蓬用洗洁精水浸泡,水洗,再先后用酒精、升汞水溶液消毒,无菌水洗,取幼果期莲子胚乳中的莲幼胚或受精8-10天的莲蓬中的子房作为外植体备用;进一步优选为:将幼果期的去壳莲子或受精8-10天的莲蓬用洗洁精水浸泡3-10分钟,流水冲洗干净,75%酒精消毒5-8分钟,0.05%升汞浸泡消毒6-8分钟,无菌水洗5-8次,取幼果期莲子胚乳中的莲幼胚或受精8-10天的莲蓬中的子房作为外植体备用。
所述方法中,两次进行诱导培养的条件优选均为:温度28℃,光强1500-1800lux、光照12-14h/d,三周后长出根系成为完整试管苗。
相较于传统育种方法,本发明具有以下优点和有益效果:
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