[发明专利]一种高效羊肚菌菌种分离装置及方法

权利要求书

1.一种高效羊肚菌菌种使用的分离装置，包括光学显微镜本体，显微镜本体设有光学显微镜载物台（1）、聚光镜（8）、弹簧夹（4）和聚光镜升降手轮（9），弹簧夹（4）设于光学显微镜载物台（1）上，聚光镜（8）设于光学显微镜载物台（1）观察孔下，其特征在于：还设有承杆柱（7）、附孢杆（6）、取孢针（3）和固定器（2），承杆柱（7）紧贴并位于聚光镜（8）正上方，承杆柱（7）顶部设有卡槽（10），附孢杆（6）放置于卡槽（10）内，固定器（2）放置于与附孢杆(6)垂直的弹簧夹(4)上，取孢针(3)针头部位插入固定器(2)中，另一端延伸于附孢杆(6)，使用时调整弹簧夹(4)使附孢针（3）针尖部分能在显微镜下触碰到附孢杆（6）且不会碰到显微镜物镜为宜。

2.根据权利要求1所述一种的高效羊肚菌菌种使用的分离装置，其特征在于：所述承杆柱（7），直径1.8-2.2cm、高0.8-1.2cm，内为中空；优化方案中直径2cm、高1cm。

3.根据权利要求1所述一种的高效羊肚菌菌种使用的分离装置，其特征在于：所述固定器（2）长1-2cm，宽1-1.5cm，高1-1.5cm。

4.根据权利要求1所述一种的高效羊肚菌菌种使用的分离装置，其特征在于：所述取孢针（3）长3-3.5cm，直径0.05-0.08cm。

5.根据权利要求1或4所述一种的高效羊肚菌菌种使用的分离装置，其特征在于：所述取孢针（3）一端插入固定器（2）高0.7cm处，取孢针针（3）中部往下弯，角度10°-15°。

6.根据权利要求1所述一种的高效羊肚菌菌种使用的分离装置，其特征在于：所述固定器放在弹簧夹正中央，与承杆柱平行，与承杆柱水平距离2.5cm-3.0cm。

7.根据权利要求1所述一种高效羊肚菌菌种分离方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)准备正在产孢的优良羊肚菌子实体：筛选生长健壮、无病虫害且开始弹射孢子的羊肚菌子实体，放入无菌培养皿备用；

(2)分离器具准备：准备超净工作台、手术刀、PDA斜面培养基、接种钩和酒精灯；

(3) 分离装置准备：用灭菌手术刀片切长0.8-1.2cm，宽0.08-0.12cm的产孢菌褶，贴于灭菌附孢杆上，使产孢部位朝外，将附孢杆放置于承杆柱卡槽内，调整位置使在显微镜下能看到羊肚菌孢子为宜；

(4)羊肚菌菌种分离：在超净工作台内，将分离装置进行擦拭消毒，并在紫外灯下照射20-30min；将所述的贴好产孢菌褶的附孢杆放置于承杆柱卡槽，调整聚光镜升降手轮使在10×物镜下能清晰看到羊肚菌孢子为宜；在酒精灯下将接种钩火烧灭菌后，从PDA斜面中勾出面积约1cm²的琼脂块，之后将取孢针火烧灭菌，稍冷却后从接种钩的琼脂块上挑取体积约1mm³的琼脂球；在显微镜视野下，缓慢调整弹簧夹，用取孢针针尖部位的琼脂块粘下羊肚菌单孢后，取下固定器将取孢针针尖的琼脂球粘于接种钩的琼脂块上，在酒精灯下将琼脂块放回PDA斜面中即可。

8.根据权利要求7所述一种高效羊肚菌菌种分离方法，其特征在于：所述PDA斜面培养基中配方为土豆200g，葡萄糖20g，琼脂10g和蒸馏水1000ml。

9.根据权利要求7所述一种高效羊肚菌菌种分离方法，其特征在于：取孢针从接种钩挑下的琼脂球体积1mm³。

10.根据权利要求7所述一种高效羊肚菌菌种分离方法，其特征在于：所述步骤（4）中用75%的酒精将分离装置进行擦拭消毒。