[发明专利]靶向还原敏感共载化疗药物与P-gp耐药逆转剂的纳米递送系统的制备方法

说明书

本发明涉及一种靶向还原敏感共载化疗药物与P‑gp耐药逆转剂的纳米递送系统的制备方法。采用具有还原敏感性两亲性共聚物PCL₇₅₀₀‑ss‑PEG₇₅₀₀‑ss‑PCL₇₅₀₀构建具有还原敏感性的聚合物囊泡，通过分子间疏水作用力包载疏水性药物紫杉醇和Tariquidar，并采用pH梯度法在其亲水内腔载入阿霉素，叶酸靶向基团通过共价键修饰于囊泡表面，从而构建了具有靶向、还原响应、化疗协同作用的聚合物囊泡。小分子P糖蛋白（P‑gp）抑制剂Tariquidar通过阻断P‑gp对底物的外排作用来减少耐药细胞的药物抵抗，增加了耐药细胞对药物的摄取，从而逆转多药耐药。本发明的纳米递送载体能够同时包载疏水性化疗药物和亲水性化疗药物，具有肿瘤靶向且对肿瘤微环境具有还原响应性，可实现逆转肿瘤的多药耐药杀伤肿瘤。

技术领域

本发明涉及一种靶向还原敏感共载化疗药物与P-gp耐药逆转剂的纳米递送系统的制备方法，具体是靶向还原敏感共载化疗药物与P-gp耐药逆转剂的聚合物囊泡的纳米递送系统的制备方法。本发明的纳米递送载体能够同时包载疏水性化疗药物和亲水性化疗药物，具有肿瘤靶向且对肿瘤微环境具有还原响应性，可实现逆转肿瘤的多药耐药并通过不同化疗药物的协同作用杀伤肿瘤。

背景技术

化疗是目前临床上治疗肿瘤的最主要的手段，由于大多数抗肿瘤药物水溶性差、不良反应较大和选择性差，严重地制约着抗肿瘤药物在临床上的应用。此外，癌症治疗中出现的一大难题是患者肿瘤组织对药物形成的耐药性。肿瘤细胞多药耐药（Multidrugresistance，MDR）是导致化疗失败、限制治愈率和降低肿瘤患者生存率的主要原因之一。因此开发合适的药物载体，将具有不同作用机制的药物同时递送到同一肿瘤细胞内，再联合MDR逆转剂克服药物被肿瘤细胞泵出，可以实现提高药效、降低毒副作用并克服肿瘤多药耐药性。

从递药系统角度克服肿瘤MDR也是众多制剂研究者的研究热点之一。与传统的化疗药物相比，纳米载药体系能够有效降低药物毒性、提高药物稳定性、改善药物分布。聚合物囊泡作为纳米制剂的一种，展现出许多优势：能同时包载疏水和亲水药物；可以利用肿瘤的EPR效应有效地将药物运输到病理区域；理想的聚合物囊泡通过胞吞作用能够消耗细胞的ATP，从而减弱P-gp的外排作用；同时通过设计肿瘤微环境响应的聚合物囊泡，能够实现药物在肿瘤靶部位的快速释放而提高疗效。本发明研究者尝试用两亲性聚合物制备具有还原响应性聚合物囊泡，同时包载疏水和亲水性化疗药物，再联合P-gp抑制剂及叶酸靶向，促进药物蓄积、增加药物生物利用度。此外，由于多药耐药细胞存在多种耐药机制，不能形成细胞内有效药物浓度，而载药纳米粒由于自身独特的尺寸效应和表面效应能够提高肿瘤组织药物浓度，达到多药耐药逆转作用。随着纳米技术研究的深入，有理由相信其会对肿瘤的治疗产生深远的影响。

P糖蛋白（P-gp/ABCB1）作为ATP结合盒式蛋白(ATP-bindingcassettetransporter，ABC）超家族最早发现的一员，在介导药物的转运中发挥着重要的作用，直接影响了药物的生物利用度。大量事实表明P-gp的存在使得耐药肿瘤细胞对抗肿瘤药物不敏感，不少学者研究了针对P-gp靶点的药物来克服肿瘤MDR。主要有1）应用P-gp调节剂或抑制剂来调节P-gp的外排作用；2）通过纳米载体包裹P-gp底物来逃避P-gp的识别作用；3）将纳米制剂与P-gp调节剂或抑制剂联合给药来发挥更好的作用。本研究采用Tariquidar为P-gp抑制剂联合纳米制剂来克服肿瘤耐药。Tariquidar作为第三代P-gp抑制剂，其各方面性能相对于第一、二代P-gp抑制剂都有所改进。而且P-gp抑制剂的应用能显著提高化疗药物的生物利用度，有效增强对肿瘤的杀伤力，可作为一个很有潜力的治疗方法。

发明内容