[发明专利]一种间充质干细胞4℃储存液

说明书

本发明涉及一种间充质干细胞4℃储存液，其成份包括人血白蛋白、海藻糖、氯化钠、葡萄糖、乳酸钠林格注射液、肝素、L‑谷氨酰胺、EDTA、磷酸盐缓冲液、亚硒酸钠、必需氨基酸、非必需氨基酸等，本发明提供的配方可以维持细胞在4℃保存或运输中经过48h仍保持80%以上的活力和70%以上的贴壁率，能够满足新鲜间充质干细胞的短途运输需求，并且该储存液使用成份明确的临床药品，对人体安全，恢复至室温可直接进行注射，极大方便了间充质干细胞制剂短途运输后的临床应用。

技术领域

本发明属于间充质干细胞领域，具体涉及一种间充质干细胞4℃储存液。

背景技术

间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSC)是一类具有自我更新、增殖和多向分化潜能的干细胞，具有来源广泛、易于采集、保存和运输、无异体排斥、避免伦理争议、刺激组织再生、调节免疫功能等诸多优点。目前使用最多的主要有脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、骨髓间充质干细胞、牙髓间充质干细胞等。

研究表明，人间充质干细胞在软骨再生、脑缺血性疾病、糖尿病、类风湿性关节炎等动物模型和临床研究中有良好的治疗效果，显示出广阔的应用前景。鉴于大多企业趋于通过体外对间充质干细胞进行分离培养、扩增，检测合格后制备成制剂，以制剂的形式应用于临床，但是在运输过程中没有一种很好的储存液来维持细胞的活力和功能，由于营养成份不足、渗透压变化、PH改变、电解质不足等引起的细胞死亡或凋亡。

但是,目前还没有一种储存效果优良的间充质干细胞4℃储存液，能够在4℃保存或运输中经过48h后仍维持间充质干细胞80％以上的活率和70％以上的贴壁率,极大的限制了间充质干细胞制剂在短途运输后的临床应用。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术问题中间充质干细胞4℃储存液存储间充质干细胞效果不理想的技术缺陷。

为此，本发明提供了一种间充质干细胞4℃储存液，该存储液的成分主要包括：人血白蛋白、海藻糖、氯化钠、葡萄糖、乳酸钠林格注射液、肝素、L-谷氨酰胺、EDTA、磷酸盐缓冲液、亚硒酸钠。

上述该存储液的各个成分的浓度为：人血白蛋白为0.5％-5％mg/ml，氯化钠为0.85％-0.9％mg/ml，葡萄糖为0.1％-5％mg/ml，海藻糖为10-200mM，乳酸钠林格注射液为86％-98％ml/ml，肝素为0.5％-2.66％IU/ml，L-谷氨酰胺为1-10mM，EDTA为0.01-0.4％mg/ml，磷酸盐缓冲液为65％-95％ml/ml，亚硒酸钠为0.01％-0.5％mg/ml，氨基酸为1％-10％ml/ml。

进一步，该存储液的各个成分的浓度具体为：人血白蛋白为1％mg/ml，氯化钠为0.9％ml/ml，海藻糖为50mM，肝素为1.33％IU/ml，L-谷氨酰胺为1mM，EDTA为0.05％mg/ml，磷酸盐缓冲液为94.8％ml/ml，亚硒酸钠为0.05％mg/ml，复合氨基酸为5％ml/ml。

进一步，该存储液的各个成分的浓度具体为：人血白蛋白为1％mg/ml，氯化钠为0.9％mg/ml，葡萄糖为5％mg/ml，乳酸钠林格注射液为91.65％ml/ml，肝素为1.33％IU/ml，L-谷氨酰胺为1mM，EDTA为0.05％mg/ml，亚硒酸钠为0.1％mg/ml，复合氨基酸为5％ml/ml。

进一步，该存储液的各个成分的浓度具体为：人血白蛋白为2％mg/ml，氯化钠为0.9％mg/ml，葡萄糖为5％mg/ml，乳酸钠林格注射液为95.10％ml/ml，肝素为1.33％IU/ml，L-谷氨酰胺为1mM，EDTA为0.05％mg/ml，亚硒酸钠为0.1％mg/ml，复合氨基酸为10％ml/ml。