[发明专利]一种乳腺癌腋窝淋巴结离体组织标本的固定处理方法

说明书

本申请涉及一种乳腺癌腋窝淋巴结离体组织标本的固定处理方法，属于测试用样品制备技术领域。将待处理离体乳腺癌腋窝淋巴结清扫组织标本浸泡于固定液中2‑24小时，冲洗后，以盐酸溶液浸泡30‑120min，冲洗，以碱液浸泡30‑120min，转入消化液中，所述消化液含有0.1‑2mg/ml蛋白酶K、1‑100mg/ml胰蛋白酶以及0.1‑2mg/ml的EDTA，恒温水浴处理1‑10小时后，切取淋巴结，常规脱水、包埋、切片、染色，即完成处理工作。以上述方法处理乳腺癌淋巴结离体组织标本，不仅有效软化溶解脂肪组织、保证淋巴结及时充分固定，还有效提高淋巴结检出数目、精确淋巴结转移阳性率。

技术领域

本申请涉及一种乳腺癌腋窝淋巴结离体组织标本的固定处理方法，属于测试用样品制备技术领域。

背景技术

现有新鲜离体标本通常是在福尔马林固定液中浸泡，这主要由于甲醛可以长时间并且很好的保存组织形态学结构特征，同时又具有良好的经济效用。此类标本处理方法虽然可以很好的固定组织的形态，但也使含有脂肪组织的标本变硬，在病理科取材特别是淋巴结取材时大大增加了难度。对于胃癌、肠癌、乳腺癌等肿瘤根治术标本中，彻底地淋巴结取材对肿瘤诊断、分期、制定治疗方案及判断预后至关重要，而常规的固定液和现有的标本固定方法都无法满足在快速固定的同时提高淋巴结的取材速度和检出率，使得病理医生在长期的离体脂肪组织中手摸刀切式寻找淋巴结，这一方法存在取材不充分、操作时间长等诸多弊端，并最终影响病人的治疗方案、预后和转归。为解决现有肿瘤根治组织标本处理技术中存在的问题，临床实际工作中急需软化或者溶解脂肪的同时充分暴露和固定淋巴结、保持淋巴结组织结构和细胞形态完整的方法。

基于此，做出本申请。

发明内容

针对现有肿瘤清扫淋巴结取材技术所存在的上述缺陷，本申请提供一种全新的乳腺癌淋巴结清扫新鲜组织标本的处理方法，在软化乳化溶解脂肪的同时固定淋巴结，保证淋巴结结构的完整和最佳染色效果。

为实现上述目的，本申请采取的技术方案如下：

一种乳腺癌腋窝淋巴结离体组织标本的固定处理方法，将待处理离体乳腺癌腋窝淋巴结清扫组织标本浸泡于固定液中2-24小时，冲洗后，以盐酸溶液浸泡30-120min，冲洗，以碱液浸泡30-120min，转入消化液中，所述消化液含有0.1-2mg/ml蛋白酶K、1-100mg/ml胰蛋白酶以及0.1-2mg/ml的EDTA，恒温水浴处理1-10小时后，切取淋巴结，常规脱水、包埋、切片、染色，即完成处理工作。

进一步的，作为优选：

所述固定液包括甲醛、卵磷脂、无水乙醇和丙酮，各组分在固定液中的浓度分别为：甲醛50～150ml/L，卵磷脂30～70g/L，无水乙醇200～300ml/L，丙酮200～300ml/L。

所述固定液还包括有去氧胆酸、甲醇和PBS溶液，去氧胆酸在固定液中的浓度为30～70g/L，甲醇在固定液中的浓度为200-300ml/L，所述PBS溶液添加至固定液中其浓度为100-200ml/L。更优选的，所述固定液是由以下浓度比的各组分构成：甲醛100ml/L，卵磷脂50g/L，无水乙醇250ml/L，丙酮250ml/L，去氧胆酸47.5g/L，甲醇250ml/L，PBS溶液1×。

所述固定液还包括有去氧胆酸、甲醇、PBS溶液和美兰，去氧胆酸在固定液中的浓度为30～70g/L，甲醇在固定液中的浓度为200-300ml/L，PBS溶液添加至固定液中其浓度为100-200ml/L，美兰在固定液中的浓度为0.05-0.15g/L。更优选的，所述固定液是由以下浓度比的各组分构成：甲醛100ml/L，卵磷脂50g/L，无水乙醇250ml/L，丙酮250ml/L，去氧胆酸47.5g/L，甲醇250ml/L，PBS溶液1×，美兰0.1g/L。所述盐酸溶液为0.05-0.2NHCl/PBS溶液。

所述碱液为0.05-0.2N NaOH/PBS溶液。