[发明专利]一种高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法

说明书

本发明属于分析化学领域，具体涉及盐酸莫西沙星有关物质的检测方法，选用苯基键合硅胶为填料的色谱柱，以缓冲液与有机相的混合溶剂梯度洗脱作为流动相进行检测。本发明通过对色谱柱、洗脱梯度及柱温等技术的改进，实现了在同一个色谱柱条件下，对盐酸莫西沙星16种杂质的有效分离。本发明稳定性好，具有良好的专属性，灵敏度高，分离度高。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及盐酸莫西沙星有关物质的检测方法。

背景技术

盐酸莫西沙星(Moxifloxacin hydrochloride)，化学名为：1-环丙基-6-氟-7-((4aS,7aS)-1H-

[3,4-b]六氢吡啶并二氢吡咯-6(2H))-8-甲氧基-4-氧-1,4-二氢喹啉-3-羧酸盐酸盐，结构式如下：

盐酸莫西沙星是德国拜耳医药公司研制的超广谱喹诺酮类抗生素，于1999年9月首次在德国上市，同年12月获FDA批准在美国上市。盐酸莫西沙星是一种具有广谱抗菌活性和杀菌作用很强的8-甲氧基氟喹诺酮类抗菌药，对革兰阳性菌，革兰阴性菌，厌氧菌，抗酸菌和非典型微生物如支原体，衣原体和军团菌等均有抗菌活性。

有关物质是指在原料药生产中带入的起始物料、试剂、中间体、副产物和异构体等物质，也可能是制剂在生产、储藏和运输过程中产生的降解产物、聚合物或晶型转变等特殊杂质。为保证药物的安全有效性，需要对药物中的有关物质进行研究、检测和监控。

发明专利CN201710154924.0使用液相色谱法检测盐酸莫西沙星注射液中有关物质时，仅能检测出5种杂质，目前还未发现能够检测盐酸莫西沙星16种有关物质的方法。

本发明通过色谱柱、优选洗脱梯度及优选柱温等技术的优选改进，达到了对盐酸莫西沙星16种有关物质的分离检测，同时也更能满足药品注册要求。本发明稳定性好，具有良好的专属性，灵敏度高，分离度高。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种采用高效液相色谱法检测盐酸莫西沙星16种有关物质的方法。本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中选用苯基键合硅胶为填料的色谱柱，柱温设置为37℃±1℃；流动相A为磷酸盐缓冲液-甲醇，体积比为80:20，流动相B为磷酸盐缓冲液-甲醇，体积比为20:80，采用梯度洗脱；磷酸盐缓冲溶液含有四丁基硫酸氢铵、磷酸二氢钾和磷酸，所述的梯度洗脱为：

本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中磷酸盐缓冲液含有四丁基硫酸氢铵0.5g/L、磷酸二氢钾1.0g/L和磷酸2ml/L。

本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中流动相的流速为0.7～0.9ml/min，检测波长为293nm或282nm。

本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中所述的样品溶液采用如下方法配制：取磷酸二氢钾1.0g，四丁基硫酸氢铵0.5g，无水亚硫酸钠0.05g，加水适量使溶解，加磷酸2ml，用水稀释至1000ml即得稀释剂；取盐酸莫西沙星或含莫西沙星的制剂适量，用稀释剂配制成每1ml中含莫西沙星0.48mg的样品溶液。

本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中所述样品溶液的进样体积为20μl。

本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中所述柱温设置为37℃。

本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中所述的色谱柱采用Agilent Poroshell 120 Phenyl Hexyl，4.6mm×100mm，2.7μm。