[发明专利]一种新塔花组织培养快速繁殖方法

说明书

本发明公开了一种新塔花组织培养快速繁殖方法。该方法通过无菌苗的获得、茎段初代培养、芽的增殖培养、芽的生根培养、炼苗及移栽等步骤实现新塔花的离体再生。本发明不仅可以不受季节限制加快成苗周期，进行大规模工厂化育苗；同时，能够排除病菌及虫害对植物的侵扰，以达到对新塔花的有效利用。

技术领域

本发明属于药用植物繁育技术领域，具体涉及一种新塔花组织培养快速繁殖方法。

背景技术

新塔花属(Ziziphora Linn.)植物大约有25～30种，分布于地中海至亚洲中部阿富汗、俄罗斯、蒙古等区域；我国有4种新塔花，均产于新疆。新塔花(Ziziphora bungeanaJuz.)为唇形科(Labiatae)新塔花属植物，又名唇香草、山薄荷、小叶薄荷，为多年生芳香半灌木植物。在国外，哈萨克斯坦、蒙古和俄罗斯有分布；而在我国仅分布于新疆，是新疆特有的药用植物。其主要分布在天山、阿尔泰山、准噶尔西部山地、帕米尔高原以及昆仑山的砾石坡地、半荒漠草地以及沙滩上，海拔约为700～1100m。新塔花在民间被用作传统维吾尔药材，其地上部分均可入药，具有很好的药用价值和应用价值；其性味为辛、凉，具有强心利湿、理气化痰、消炎散结、疏散风热、清利头目、宁心安神、利水清热、壮骨强身的功效。其被广泛用于治疗感冒发热，目赤肿痛，头痛咽痛，心悸失眠等症；有报道称其在临床上被用于治疗高血压、冠心病及心脑血管等疾病，起到保护与治疗心肌缺血引起心肌细胞与其它细胞损伤的作用；还可被用于治疗心脏病，气短多汗，水肿，气管炎，肺脓肿等疾病。

在此之前，新塔花主要采用播种的方法进行繁育，其发芽率较低，远不能满足实际生产的需要，本发明以新塔花无菌苗茎段为材料，通过组织诱导、增殖、分化、生根、炼苗移栽等过程获得新塔花离体再植株，建立新塔花组织培养快速繁殖技术方法，为新塔花工厂化，规模化、产业化提供技术支持。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新塔花组织培养快速繁殖方法，本发明以新塔花无菌苗茎段为材料，通过无菌苗的获得、茎段初代培养、芽的增殖培养、芽的生根培养、炼苗及移栽等步骤实现新塔花的离体再生。

一种新塔花组织培养快速繁殖方法，按如下所述步骤进行：

(1)种子的消毒：将新塔花种子用纱布包好，在无菌操作台中采用酒精溶液浸泡消毒处理，然后无菌水冲洗，移入NaClO溶液中振荡消毒，再次于无菌水中冲洗，沥干后置于铺有无菌滤纸的培养皿上备用；

(2)无菌苗的获得：将灭菌后的新塔花种子接种于萌发培养基中，连续培养；

(3)茎段初代培养：在无菌操作台中，将获得的无菌苗的茎切成段，接种于初代培养基中，连续培养；

(4)芽的增殖培养：将茎段初代培养得到的芽切成单芽后接种插入增值培养基中，继续培养2-4天；

(5)芽的生根培养：将增殖培养后的芽接种于含有NAA生根培养基中，培养15-20天后；

(6)炼苗移栽：将步骤(5)获得的生长良好且健壮的生根苗置于自然光照下炼苗5-8天后，将幼苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入基质，置于光照培养箱内培养，每天以1/2MS大量元素营养液给幼苗浇水，保持湿度，待幼苗成活后再移栽。

步骤(1)所述酒精溶液的体积浓度为75％，浸泡40s；NaClO溶液的质量浓度为2％，振荡消毒4min。

步骤(2)接种后，再每天光照时间为16h，温度为25-27℃，光照强度为8000Lx的条件下，连续培养40天。

所述的萌发培养基为：MS培养基中含3％的蔗糖和0.7％的琼脂，培养基pH为5.8-6.0。

步骤(3)所述切成的段长1cm；所述接种后，在每天光照时间为16h，温度为25-27℃，光照强度为8000Lx的条件下，连续培养30天。