[发明专利]丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒

说明书

本发明提供了一种丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒，试剂盒由第一试剂和第二试剂组成；R1：三羟甲基氨基甲烷(Tris)、还原性辅酶I(NADH)、乳酸脱氢酶(LDH)、叠氮钠(NaN3)、乙二醇双(2‑氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)、烷基糖苷(APG)；R2三羟甲基氨基甲烷(Tris)、L‑丙氨酸、α‑酮戊二酸、叠氮钠(NaN3)。本发明通过添加EGTA和烷基糖苷(APG)的组合能有效改善NADH的稳定性，保证试剂一年的有效期。

技术领域

本发明属于临床体外诊断试剂技术领域，涉及丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒。

背景技术

丙氨酸氨基转移酶(ALT)是能够催化丙氨酸与α-酮戊二酸之间的氨基转移酶，是一种参与人体蛋白质新陈代谢的酶，起着加快人体内蛋白质在体内转化的作用，该酶广泛存在于人体各种组织、器官、肌肉、骨骼中，以肝脏细胞的细胞浆中最多。一旦有肝细胞遭到损害、肝功能下降、肝细胞坏死，细胞内的ALT即可释放到细胞外，从而导致血清中ALT含量升高。ALT活性升高表示有肝细胞损伤，也可见于心肌及骨骼肌损伤。血清ALT活性是肝细胞损伤的敏感指标，尤其是病毒性肝炎的重要标志，目前ALT临床上主要用来检测肝功能。

现有ALT试剂中NADH稳定性不好，试剂放置一年，空白吸光度小于1，导致试剂失效。因此，需要优化反应体系，以提高NADH的稳定性。

用于体外定量测定人体血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)的活性。

人体多种脏器都含有ALT，主要分布在肝、肾、心、肌肉，肝内ALT活性远远超过其它脏器的活性，主要存在肝细胞质的可溶性部分，故测定ALT活性可反映肝脏损害具有特殊的意义。

丙氨酸氨基转移酶检验原理

上述偶联反应中，可引起波长340nm处的吸光度下降，下降速率与ALT活性成正比，从而计算ALT的活性。

注：NADH最大吸收波长为340nm，NADH被氧化为NAD，从而导致340nm出吸光度的下降。

发明内容

本发明提供了一种改善丙氨酸氨基转移酶NADH的稳定性的试剂盒。

本发明的技术方案是：

一种丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒，试剂盒由第一试剂和第二试剂组成；

R1 三羟甲基氨基甲烷

还原性辅酶I

乳酸脱氢酶

叠氮钠

乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸

烷基糖苷

R2 三羟甲基氨基甲烷

L-丙氨酸

α-酮戊二酸

叠氮钠(NaN3)。

进一步地，上述第一试剂和第二试剂组成为：

本发明的技术方案通过加入EGTA和烷基糖苷(APG)的组合能有效改善NADH的稳定性。

附图说明

图1是临床样本比对的结果图。

具体实施方式

本发明下面就具体的实施方式作进一步地说明。

配方1(目前使用配方)