[发明专利]用于分离和富集细胞的分离液、试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种用于分离和富集细胞的分离液，其特征在于，包括，所述的分离液包括分离介质、粘度调节剂、防腐剂和超纯水。

2.根据权利要求1所述的一种用于分离和富集细胞的分离液，其特征在于，所述的分离液中各组分质量占比：分离介质1%-10%，粘度调节剂1%-10%，防腐剂0.1%-5%，超纯水补足所需克重。

3.根据权利要求1或2所述的一种用于分离和富集细胞的分离液，其特征在于，所述的分离介质采用蔗糖、聚蔗糖或者Percoll（硅石胶态悬浮液）。

4.根据权利要求1或2所述的一种用于分离和富集细胞的分离液，其特征在于，所述的粘度调节剂采用泛影葡胺、泛影酸钠和羧甲基纤维素钠中的两种组合。

5.根据权利要求4所述的一种用于分离和富集细胞的分离液，其特征在于，所述的所述的粘度调节剂中两种组合的配比在1：5-7。

6.根据权利要求1或2所述的一种用于分离和富集细胞的分离液，其特征在于，所述的所述的防腐剂采用苯酚、苯甲酸、山梨酸钾或者尼泊金甲酯。

7.一种用于分离和富集细胞的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒含有权利要求1-6中任一所述的分离液。

8.一种分离和富集细胞的方法，其特征在于，所述的方法中采用权利要求1-6中所述的分离液或者采用权利要求7所述的试剂盒。

9.根据权利要求8所述的一种分离和富集细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：将分离液加入离心管；

S2：将待分离样本缓慢加入S1中的分离液上层；

S3：第一次离心，离心后吸弃上层标本；进入第二次离心，离心后倒弃剩余分离液，管底的细胞沉淀即为富集的单一细胞；

S4：S3中的细胞沉淀通过液基细胞学制片。

10.根据权利要求9所述的一种分离和富集细胞的方法，其特征在于，所述的S4中的液基细胞学制片采用沉降制片法或者滴片法。

11.根据权利要求10所述的一种分离和富集细胞的方法，其特征在于，所述的沉降制片法包括以下步骤：

S11:S3中的细胞沉淀用缓冲液稀释，用振荡器混匀细胞团;

S12:细胞稀释液转移至沉降制片机上，自动制片，染色。

12.根据权利要求10所述的一种分离和富集细胞的方法，其特征在于，所述的滴片法包括以下步骤：

S21：S3中的细胞沉淀用缓冲液稀释，用振荡器混匀细胞团;

S22：用滴管吸S21处理后的细胞稀释液在玻片正上方1-2mm处，滴两滴细胞液，制成一张均匀细胞薄片；

S23：晾干后，用95%乙醇固定15min，染色。

13.根据权利要求9所述的一种分离和富集细胞的方法，其特征在于，所述的S3中两次离心的条件为：第一次离心：100-600g，1-10min ,第二次离心的条件为：200-2000g，1-20min。