[发明专利]细胞生存率判定装置以及细胞生存率判定方法

说明书

本发明提供能够不使用染色试剂并且不依赖于细胞的自体荧光地判定细胞的生存率的细胞生存率判定装置以及细胞生存率判定方法。该细胞生存率判定装置包括：分布取得部(301)，其获得含有包含培养细胞的粒子的溶液中的粒子的大小的分布；分类部(302)，其在分布中，使用规定的阈值将粒子分类为小粒子群和大粒子群；比计算部(303)，其计算出属于小粒子群的粒子的数量与属于大粒子群的粒子的数量之比的值；以及生存率判定部(304)，其使用预先取得的比与细胞的生存率的关系，根据比的值判定培养细胞的生存率。

技术领域

本发明涉及细胞培养技术，涉及细胞生存率判定装置以及细胞生存率判定方法。

背景技术

在生物过程和细胞培养领域，为了控制细胞培养条件，以及为了判断细胞培养的停止时期等，对培养细胞的生死进行判定，从而测定生存率。作为判定细胞生死的判定方法，提出了使荧光色素与细胞内的核酸结合，根据激发的荧光的强度对细胞的生死进行判定的方法(参照例如专利文献1。)。此外，还已知有利用透过死细胞的细胞膜将死细胞的细胞质染成蓝色的锥虫蓝染色，来判定细胞的生死的方法。

但是，染色试剂价格昂贵，而且对细胞进行染色的工序繁杂。此外，染色试剂往往对人体有害。因此染色试剂需要管理、保管。此外，用染色试剂染色后的细胞难以继续培养，废液的处理也必须注意。对此，提出了不使用染色试剂，而是根据细胞发出的自体荧光来判定细胞的生死的方法(例如参照专利文献2)。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本专利第2592114号公报

专利文献2：日本专利第4868879号公报

发明内容

发明要解决的课题

由于细胞发出的自体荧光较微弱，因此有时需要较长的曝光时间，或需要高灵敏度的荧光检测装置。在此，本发明的目的在于，提供一种能够不使用染色试剂并且不依赖于细胞的自体荧光地判定细胞的生存率的细胞生存率判定装置以及细胞生存率判定方法。

解决课题的手段

根据本发明的方式，提供一种细胞生存率判定装置，包括：分布取得部，其获得含有包含培养细胞的粒子的溶液中的粒子的大小的分布；分类部，其在分布中，使用规定的阈值将粒子分类为小粒子群和大粒子群；比计算部，其计算出属于小粒子群的粒子的数量与属于大粒子群的粒子的数量之比的值；以及生存率判定部，其使用预先取得的比与细胞的生存率的关系，根据比的值判定培养细胞的生存率。

在上述细胞生存率判定装置中，也可以是，分布取得部根据溶液的图像，获得粒子的大小的分布

在上述细胞生存率判定装置中，也可以是，分布取得部根据在各个粒子上产生的散射光的强度，获得粒子的大小的分布。

上述细胞生存率判定装置还可以包括：流路，溶液在流路中流通，且流路能够卸下；测定室，其连接于流路，且能够卸下；照射器，其对测定室内照射测定光；以及散射光测定器，其测定被照射了测定光的测定室内产生的散射光的强度。

在上述细胞生存率判定装置中，培养细胞也可以被悬浮培养。

在上述细胞生存率判定装置中，培养细胞也可以是中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。

此外，根据本发明的方式，提供一种细胞生存率判定方法，其包括：获得含有包含培养细胞的粒子的溶液中的粒子的大小的分布；在分布中，使用规定的阈值将粒子分类为小粒子群和大粒子群；计算出属于小粒子群的粒子的数量与属于大粒子群的粒子的数量之比的值；使用预先取得的比与细胞的生存率的关系，根据比的值判定培养细胞的生存率。

在上述细胞生存率判定方法中，也可以根据溶液的图像获得粒子的大小的分布。