[发明专利]杉木组织培养快速繁殖方法

权利要求书

1.杉木组织培养快速繁殖方法，其特征是依次包括以下步骤：

1)、外植体采集及消毒：

采用杉木树桩基部当年生萌动状态的健康枝条作为外植体，将其进行消毒，得消毒处理后枝条；

2)、诱导不定芽：

将消毒处理后的枝条，剪成长为1.5±0.2cm的茎段，再将所述茎段上的叶片修剪至长为0.5±0.1cm，然后接种到诱导培养基中进行培养，直至茎段上诱导生成1～3cm高的不定芽；

培养条件为：光照时间16±0.5小时/天，光照强度为1600±100lx，培养温度为25±2℃，空气相对湿度为75±3％；

诱导培养基为：CLA+0.2mg/L NAA+蔗糖30g/L+琼脂粉7g/L，PH5.8；

3)、不定芽增殖：

割取步骤2)所得的不定芽接种到增殖培养基中进行增殖培养，直至长至3～6cm高；

培养条件为：光照时间16±0.5小时/天，光照强度为1600±100lx，培养温度为25±2℃，空气相对湿度为75±3％；

增殖培养基为：CLA+1mg/L NAA+蔗糖30g/L+琼脂粉7g/L，PH5.8；

4)、分化生根；

将步骤3)所得的不定芽接种到生根培养基中进行分化生根，直至获得长度≥4cm且至少有3条长于2cm根的植株；

培养条件为：光照时间16±0.5小时/天，光照强度为1600±100lx，培养温度为25±2℃，空气相对湿度为75±3％；

生根培养基：1/2CLA+1mg/L NAA+VB₁₂ 1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉7g/L，PH5.8；

1L杉木组培快繁培养基CLA由如下浓度的成分和作为余量的水组成，然后经高温灭菌；

5)、炼苗移栽：

将步骤4)所得的植株进行炼苗移栽。

2.根据权利要求1所述的杉木组织培养快速繁殖方法，其特征是所述步骤5)为：

将步骤4)所得的瓶苗移至室温打开瓶盖，一周后出瓶，洗去附着于根部的培养基并晾干至根系发白，移栽至基质容器中置于人工气候箱室培养，培养条件为温度20～27℃，湿度85％～90％，光照强度先设定为15～25μmol·m^-2·s^-1；3～5周后光照强度改为30～40μmol·m^-2·s^-1；2个月后，获得杉木苗。

3.根据权利要求1所述的杉木组织培养快速繁殖方法，其特征是所述步骤1)为：

将枝条先在流水下冲洗0.5～2h，用毛刷刷洗，再用自来水冲洗60～90min，用蒸馏水冲洗，吸干水分后，将枝条上的针叶修剪至长度为1±0.2cm，于超净工作台中以75％乙醇溶液浸泡30～60s，立即用0.1～0.5％升汞溶液消毒8～10min，无菌水冲洗3～5次后用无菌滤纸吸干表面的水分。