[发明专利]一种快速制备蛋白变性或非变性电泳缓冲液的预制试粉及其使用方法

说明书

一种快速制备蛋白变性或非变性电泳缓冲液的预制试粉及其使用方法属于生物学分析领域，其组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，每份预制试粉含有3.02g的Tris碱、18.8g的甘氨酸、1g的SDS、0.68‑0.72g的KH₂PO₄。蛋白非变性电泳缓冲液的预制试粉的组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，每份预制试粉含有3.02g的Tris碱、18.8g的甘氨酸、0.80‑0.84g的KH₂PO₄。使用时，室温下，将每一份的试粉与1L去离子水充分混合互溶，即得到1L 1×浓度的电泳缓冲液。本发明的预制试粉使用方法简便快速，制备过程在5‑10分钟内完成，提高蛋白电泳实验的整体效率；所制备的缓冲液，具有较长的电泳寿命和较好的蛋白稳定性。

技术领域

本发明属于生物学分析领域，提供一种生物化学实验分析中，用于蛋白质电泳缓冲液快速制备的预制试粉及其使用方法。

背景技术

蛋白变性和非变性电泳检测在蛋白的生物化学分析实验中，具有重要地位，是蛋白质量和浓度检测的常规方法之一，是分析蛋白片段大小、质量浓度和纯度的重要依据。常规的蛋白电泳经常使用Tris碱-甘氨酸体系，并在变性电泳缓冲液中，添加SDS变性剂，在非变性电泳中不加变性剂。而传统的蛋白电泳缓冲液的制备需要实验工作人员自主完成，包括称量多项药品、准确调节pH值、适当稀释缓冲液等多项步骤。配制过程耗时耗力，且pH值调节过程增加了实验时间和误差，不利于蛋白电泳实验的快速开展。

本发明提供了一种供蛋白变性和非变性电泳使用的缓冲液预制试粉，无需称量步骤，无需pH值调节，仅需取一至几份封装在塑料容器或袋中的预制试粉，与一定体积的去离子水混合，即可制得固定浓度和pH值(8.3±0.1)的蛋白电泳缓冲液，减轻了缓冲液配制的人力，提高了缓冲液制备的效率和准确性。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了两种快速制备蛋白电泳缓冲液的预制试粉。该试粉的主要成分包括Tris碱(三羟甲基氨基甲烷)、甘氨酸、SDS(十二烷基硫酸钠)、以及KH₂PO₄(磷酸二氢钾)。使用该试粉所制得的电泳缓冲液，能够省略称量与pH值调节步骤，通过与一定体积的去离子水混合互溶，快速制备固定浓度、固定pH值的变性和非变性的蛋白电泳缓冲液。

为了达到上述目的，本发明的技术方案如下：

一种快速制备蛋白变性电泳缓冲液的预制试粉，其组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的缓冲液，每份预制试粉含有3.02g的Tris碱、18.8g的甘氨酸、1g的SDS、0.68-0.72g的KH₂PO₄。由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱25mmol/L、甘氨酸250mmol/L、SDS3.5mmol/L，KH₂PO₄ 5.0-5.3mmol/L，pH值稳定在8.3±0.1之间。试粉中所有物料均完全混合，以散粉或压片形式，储存或封装在塑料容器或袋中。所述的KH₂PO₄可以被其他含不同结晶水的KH₂PO₄所代替，但KH₂PO₄的质量浓度保持不变。

所述的基于配制1L一倍(1×)浓度的缓冲液，每份预制试粉中KH₂PO₄的质量优选为0.7g。由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱25mmol/L、甘氨酸250mmol/L、SDS 3.5mmol/L，KH₂PO₄ 5.1mmol/L，pH值稳定在8.3±0.1之间。