[发明专利]一种基于硼酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉及其使用方法在审
申请号: | 201810337699.9 | 申请日: | 2018-04-12 |
公开(公告)号: | CN108548710A | 公开(公告)日: | 2018-09-18 |
发明(设计)人: | 徐卫平;王文霞;刘玉婷;许建强;佟慧妍;穆罕默德·拉塞尔;杨骁婧 | 申请(专利权)人: | 大连理工大学 |
主分类号: | G01N1/38 | 分类号: | G01N1/38;G01N27/447 |
代理公司: | 大连理工大学专利中心 21200 | 代理人: | 李晓亮;潘迅 |
地址: | 124221 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 硼酸 电泳缓冲液 核酸电泳 缓冲液 预制 配制 快速制备 调节溶液pH 生物学分析 充分混合 去离子水 实验效率 称量 互溶 | ||
本发明属于生物学分析领域,提供一种基于硼酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉及其使用方法。其组成成分及重量如下:基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液,每份预制试粉含有9.6‑12g的Tris碱、4.89‑6.11g的硼酸、0.186‑0.744g的Na2EDTA·2H2O、3.40‑3.67g的KH2PO4。使用时,在室温下,每一份的试粉与1L去离子水充分混合互溶,即得到1L 1×浓度的电泳缓冲液。本发明配制电泳缓冲液时省去了常规方法的称量多项药品、调节溶液pH值的步骤,使得缓冲液的配制过程在5‑10分钟内完成,提高核酸电泳实验效率。
技术领域
本发明属于生物学分析领域,提供一种生物化学或分子生物学实验分析中,用于核酸电泳缓冲液快速制备的预制试粉及其使用方法。
背景技术
电泳检测在核酸的生化和分子生物学分析中,具有重要地位,是核酸质量和浓度检测的常规方法之一,是分析DNA和RNA片段大小、质量浓度和纯度的重要依据。传统的核酸电泳主要使用醋酸盐缓冲体系TAE(Tris-Acetic acid-EDTA)或硼酸盐缓冲体系TBE(Tris-Boric acid-EDTA)。相对于TAE缓冲液,TBE缓冲液具有更好的核酸稳定性和更长的电泳寿命,但不论是TAE还是TBE缓冲液,都需要实验人员自主配制,包括称量多项药品和调节pH值等步骤,浪费较多人力和时间。急需开发一种简单、快速、准确配制固定浓度和pH值的电泳缓冲液方法,以提高电泳实验整体效率。
本发明针对以上实验需求和方法不足,开发出一种快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉,该试粉为改良的TBE缓冲液,使用Tris碱、硼酸、Na2EDTA、以及KH2PO4为主成分,按一定比例与去离子水混合互溶后,可以在5-10分钟内,快速制备核酸电泳缓冲液,减少电泳实验准备时间,提高电泳实验效率。
发明内容
针对现有技术存在的问题,本发明提供了一种基于硼酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉。该试粉的主要成分包括Tris碱(三羟甲基氨基甲烷)、硼酸(H3BO3)、Na2EDTA(乙二胺四乙酸二钠)、以及KH2PO4(磷酸二氢钾)。使用该试粉所制得的电泳缓冲液,是传统TBE(Tris-Boric acid-EDTA)即硼酸盐缓冲液的改良体系。
为了达到上述目的,本发明的技术方案如下:
一种基于硼酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉,其组成成分及重量如下:基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液,每份预制试粉含有9.6-12g的Tris碱、4.89-6.11g的硼酸、0.186-0.744g的Na2EDTA·2H2O、3.40-3.67g的KH2PO4。由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为:Tris碱80-100mmol/L、硼酸80-100mmol/L、Na2EDTA 0.5-2mmol/L,KH2PO4 25-27mmol/L,pH值稳定在7.8-8.2之间。试粉中所有物料均完全混合,以散粉或压片形式,储存或封装在塑料容器或袋中。所述的Na2EDTA·2H2O和KH2PO4可以被其他含不同结晶水的Na2EDTA所代替,但Na2EDTA和KH2PO4的质量浓度保持不变。
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