[发明专利]一种利用褪黑素联合缺氮促进异养微藻油脂积累的方法在审
| 申请号： | 201810337623.6 | 申请日： | 2018-04-16 |
| 公开（公告）号： | CN108588136A | 公开（公告）日： | 2018-09-28 |
| 发明（设计）人： | 余旭亚;赵永腾;李大菲 | 申请（专利权）人： | 昆明理工大学 |
| 主分类号： | C12P7/64 | 分类号： | C12P7/64;C12N1/12;C12R1/89 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 650093 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 黑素 藻细胞 诱导 异养微藻 油脂积累 单针 母液 微藻 稀释 藻液 生物技术领域 有机溶剂提取 葡萄糖 对数生长期 基础培养基 光照条件 微藻生长 无水乙醇 异养培养 诱导培养 培养基 产业化 生物量 重悬浮 配制 联合 生长 保证 | ||
1.一种利用褪黑素联合缺氮促进异养微藻油脂积累的方法，其特征在于，具体步骤如下：
（1）诱导藻液的制备：在温度为24~26℃条件下，以10 g/L葡萄糖为碳源的BG-11基础培养基异养培养单针藻，待单针藻生长至对数生长期后期收集藻细胞，用缺氮的BG-11培养基稀释重悬浮藻细胞至0.85~1 g/L作为诱导藻液；
（2）诱导藻细胞积累油脂：用无水乙醇配制100 μmol/L的褪黑素母液，将褪黑素母液添加到步骤（1）的诱导藻液中稀释褪黑素浓度为0.1~10 μmol/L，并置于温度为24~26℃、光照条件下诱导培养；
（3）利用有机溶剂提取步骤（2）藻细胞内的油脂。
2.根据权利要求1所述利用褪黑素联合缺氮促进异养微藻油脂积累的方法，其特征在于：单针藻为单针藻菌株
3.根据权利要求1所述利用褪黑素联合缺氮促进异养微藻油脂积累的方法，其特征在于：步骤（2）中光照强度为29~31 μmol m−2 s−1。
4.根据权利要求1所述利用褪黑素联合缺氮促进异养微藻油脂积累的方法，其特征在于：步骤（3）中有机溶剂为氯仿-甲醇溶液，氯仿-甲醇溶液中氯仿与甲醇的体积比为1:2；有机溶剂提取藻细胞内的油脂的方法为：将培养液经5000 r/min离心富集5 min，用蒸馏水反复洗涤3次后冻干制成干藻粉，称重；加入石英砂并研磨混匀，再加入氯仿-甲醇溶液重复抽提至藻体发白，离心收集有机相即得油脂；其中石英砂的质量为干藻粉质量的2倍。
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