[发明专利]苯海拉明胶体金快速测试装置及其制备方法和用途在审
| 申请号: | 201810307910.2 | 申请日: | 2018-04-08 |
| 公开(公告)号: | CN108732343A | 公开(公告)日: | 2018-11-02 |
| 发明(设计)人: | 罗卓雅;庄玥;刘亚雄 | 申请(专利权)人: | 广东省药品检验所(广东省药品质量研究所;广东省口岸药品检验所);中山大学 |
| 主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/531 |
| 代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 胡辉;舒胜英 |
| 地址: | 510180 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 苯海拉明 胶体金试纸条 快速测试装置 硝酸纤维素膜 底板 多克隆抗体 反应杯 检测线 胶体金 质控线 制备 胶体金标记抗体 胶体金检测装置 兔抗鼠抗体 偶联抗原 特异性强 同一方向 有效检测 吸水纸 样品垫 铺设 | ||
1.一种苯海拉明胶体金检测装置,其特征在于,该装置包括试纸条和反应杯两部分:其中试纸条包括底板,沿同一方向依次铺设的样品垫,硝酸纤维素膜和吸水纸,硝酸纤维素膜上含有检测线和质控线;反应杯内含有胶体金标记的苯海拉明多克隆抗体。
2.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,所述检测线为能与苯海拉明多克隆抗体结合的苯海拉明偶联抗原。
3.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,所述质控线为能与苯海拉明多克隆抗体结合的兔抗鼠抗体。
4.权利要求1~3任一所述的苯海拉明胶体金检测装置的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)胶体金标记多克隆抗体的制备:调节胶体金溶液pH值至7~9,边搅拌边滴加入苯海拉明的多克隆抗体,0.5~1.5h后加入抗体量相当的PEG,反应20~35min后加入抗体量相当的BSA,继续搅拌20~35min,离心获得均一性胶体金标记多克隆抗体沉淀,再加PNPB重悬备用;
2)在底板上,沿同一方向依次将样品垫、喷涂有检测线和质控线的硝酸纤维素膜、吸水纸依次搭接粘连;反应杯内加入胶体金标记多克隆抗体,冻干。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述胶体金的制备方法为:取0.5~1.5%氯金酸溶液0.5~1.5ml,加90~100ml超纯水制成氯金酸溶液,加热沸腾后,取0.5~2%柠檬酸三钠1.0~2ml迅速加入煮沸的氯金酸溶液中,继续加热至溶液由淡黄色转为蓝黑色最终变为亮红色,颜色稳定后继续加热4~6min,室温冷却,补充失水至原体积。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤1)所述离心的转速为8000~10000rpm,离心时间为25~35min。
7.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述检测线为能与苯海拉明多克隆抗体结合的苯海拉明偶联抗原,通过在硝酸纤维素膜上进行线状点样制得。
8.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述质控线为能与苯海拉明多克隆抗体结合的兔抗鼠抗体,通过在硝酸纤维素膜上进行线状点样制得。
9.权利要求1~3任一所述的苯海拉明胶体金检测装置在检测苯海拉明中应用。
10.一种检测苯海拉明的方法,其特征在于,包括以下步骤:吸取2~3滴待测样本到反应杯中,混匀,插入权利要求1~3任一所述的苯海拉明胶体金检测装置,室温孵育3~6分钟;取出装置,进行结果判读;若T线与C线同时显示紫红色条带,则结果为阴性;若T线颜色比C线浅或C线显色而T线不显色,则结果为阳性;若C线、T线均不显色,则检测装置已失效。
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