[发明专利]一种同时提取分离雷公藤内酯甲和雷公藤内酯乙的方法

说明书

本发明涉及一种同时提取分离雷公藤内酯甲和雷公藤内酯乙的方法，包括以下步骤：步骤S1、南蛇藤茎粉碎成粗粉，乙醇回流提取，浓缩；步骤S2、将步骤S1得到的粗提浸膏加水分散，乙酸乙酯萃取；步骤S3、将乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱层析，石油醚‑乙酸乙酯[1：0→5：1→3：1]梯度洗脱，每个梯度合并成1个部分；步骤S4、将石油醚‑乙酸乙酯[5：1]部分硅胶柱色谱分离，石油醚‑丙酮[15：1]洗脱，得到雷公藤内酯乙粗品，再用石油醚‑丙酮[10：1]洗脱，得到雷公藤内酯甲粗品；步骤S5、将上述粗品用无水乙醇溶解后重结晶。该方法充分利用资源较广泛的南蛇藤药材提取分离雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙，大大降低了制备成本，具有较高的社会经济效益。

技术领域

本发明属于药用植物活性成份的提取技术领域，具体涉及一种从南蛇藤茎中同时提取分离雷公藤内酯甲和雷公藤内酯乙的方法。

背景技术

南蛇藤(Celastrus orbiculatus Thunb．)是卫矛科南蛇藤属植物，又名过山风 ，老牛筋（辽宁），降龙草（江苏），钻山龙（江西），穿山龙（福建）等。南蛇藤始载于清代《植物名实图考》，其根、藤茎、叶、果实和种子均可入药，主要分布于我国的东北、西北、华北、华东、西南、广东和两湖地区，药材资源极其丰富，且没有毒性。

传统中医认为其具有清热、祛风、除湿、活血解毒消肿的功效，常用于治疗风湿性关节炎、腰腿痛、筋骨痛、牙痛、闭经、痢疾、跌打损伤、肠风痔漏、毒蛇咬伤、疮疡、痈疖等症；现代药理研究表明南蛇藤具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒等活性，目前多用于治疗风湿性及类风湿性关节炎、血液病及皮肤病。

近年来，许多学者对雷公藤内酯类的药理活性和临床应用进行深入而广泛的研究，发现雷公藤内酯甲具有很强的抗肿瘤及免疫抑制作用，雷公藤内酯乙也具有良好的药物活性。

目前，雷公藤内酯甲和雷公藤内酯乙的制备通常是从雷公藤药材中提取纯化获得；然而，由于雷公藤药材毒性大，产量低，严重影响了雷公藤内酯的提取产量，制约了雷公藤内酯活性成分的研究；此外，由于雷公藤药材中活性成分复杂，现有雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙的提取方法并不完善，提取收率极低，例如：中国专利 CN 105968168A 公开了一种从雷公藤中提取分离雷公藤内酯甲的方法，虽然该方法比以往文献报道的提取工艺提高了10-20倍，但提取收率也仅为万分之一（即：10kg雷公藤最终提取约1.0g的雷公藤内酯甲）。

基于上述技术问题，有必要研究开发一种新的雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙的提取分离方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从南蛇藤茎中同时提取分离雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙的方法，以解决现有从雷公藤中提取雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙提取收率低，无法规模化生产的技术难题。

本发明通过研究发现南蛇藤中雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙的含量较高，由于南蛇藤药材分布广，产量较大，且没有毒性，因此尝试从南蛇藤茎中提取分离雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙，本发明通过对有机溶剂的合理选择，最后成功的将雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙从成分复杂的南蛇藤中分离提取出来。

为实现上述目的，本发明具体是采用如下技术方案实现的：

步骤S1、南蛇藤茎粉碎成粗粉，加入其重量8-10倍量，体积百分比为95％的乙醇，回流提取2-3次，每次2-3 h，合并提取液，浓缩，得粗提浸膏；

步骤S2、将步骤S1得到的粗提浸膏加适量水分散，用乙酸乙酯萃取，合并萃取液，回收溶剂至干，得乙酸乙酯萃取物；

步骤S3、将步骤S2得到的乙酸乙酯萃取物与重量为乙酸乙酯萃取物1.5-2倍的100~200目硅胶拌样后，上乙酸乙酯萃取物10倍量，200~300目硅胶柱，进行硅胶柱层析，采用石油醚-乙酸乙酯[1：0→5：1→3：1]梯度洗脱，收集洗脱液，每个梯度合并成1个部分；