[发明专利]表达猪圆环病毒Cap蛋白基因的重组猪伪狂犬病病毒弱毒株、及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种重组猪伪狂犬病病毒弱毒株，该弱毒株同时具有猪伪狂犬病病毒抗原的免疫原性和猪圆环病毒抗原的免疫原性。该重组猪伪狂犬病病毒弱毒株制备的疫苗组合物不仅能同时提供对猪伪狂犬病病毒和猪圆环病毒的完全保护；还能针对不同地域来源的猪圆环病毒完全保护，且保护效果优于相应的亚单位疫苗。

技术领域

本发明涉及一种表达猪圆环病毒Cap蛋白基因的重组猪伪狂犬病病毒弱毒株、制备方法及利用该重组病毒株制备的疫苗组合物，属于兽用生物制品领域。

背景技术

猪圆环病毒(Porcine circovirus，PCV)属于圆环病毒科圆环病毒属，是目前为止发现的最小的脊椎动物病毒。PCV根据致病性、抗原性及核苷酸序列的不同分为PCV1、PCV2和PCV3三种基因型。其中PCV1广泛存在于猪群但对其无致病性，基因组长度为1759bp。PCV2具有致病性，基因组长度为1767bp或者1768bp。PCV3是新近在猪的繁殖障碍病例中分离并确认致病病原的猪圆环病毒，基因组长度为2.0kb。

猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus，PRV)主要引起猪严重的神经症状、呼吸道疾病和生殖障碍。猪的伪狂犬病在我国广泛存在，危害严重，是制约规模化猪场生产的主要疫病之一。最近流行的猪伪狂犬病发生了新的特点，突出表现为任何年龄的猪都会感染，可在猪群水平传播，潜伏期短(1～2天)，发病率最高可达100％，发病猪死亡率最高可达100％，感染后可引起猪只高热(40～42℃，持续3日以上)。现有技术的疫苗免疫猪只后不能完全抵抗野毒攻击，依然会出现高热，精神沉郁，食欲下降或废绝等症状，感染率超过80％，发病率超过30％，死亡率在10％～20％之间。

临床上，PCV2、PCV3与PRV常呈现混合感染情况，从而使疫情变得更加严重。目前国内外还没有一种能同时控制PCV2、PCV3、PRV感染的疫苗，更没有一种能同时控制最近流行的PCV2、PCV3、新的PRV感染的疫苗，因此，为应对临床上新的情况，急需提供一种能一针解决这几种疫病爆发的疫苗。

发明内容

为解决上述问题，本发明将猪圆环病毒Cap蛋白基因重组进猪伪狂犬病病毒弱毒株，构建表达猪圆环病毒Cap蛋白基因的重组猪伪狂犬病病毒株。

本发明提供一种重组猪伪狂犬病病毒弱毒株，其中，所述重组猪伪狂犬病病毒弱毒株基因组重组有猪圆环病毒Cap蛋白，能表达猪圆环病毒Cap蛋白，所述猪圆环病毒Cap蛋白基因为猪圆环病毒2型和/或3型Cap蛋白基因。

本发明的重组猪伪狂犬病病毒弱毒株能表达猪圆环病毒Cap蛋白，因此不仅具有猪伪狂犬病病毒抗原的免疫原性，还具有猪圆环病毒抗原的免疫原性。

作为本发明的一种实施方式，本发明所述重组猪伪狂犬病病毒弱毒株来源的猪伪狂犬病病毒弱毒株为猪伪狂犬病病毒变异株的弱毒株。

作为本发明的一种优选实施方式，所述猪伪狂犬病病毒的弱毒株为HN1201株或HN1202株的弱毒株。

作为本发明的一种更优选实施方式，所述猪伪狂犬病病毒弱毒株为HN1201-R株。

作为本发明的一种实施方式，本发明的重组猪伪狂犬病病毒弱毒株中，所述猪圆环病毒2型Cap蛋白基因为猪圆环病毒2型new基因亚型Cap蛋白基因。

作为本发明的一种优选实施方式，本发明的重组猪伪狂犬病病毒弱毒株中，所述猪圆环病毒2型new基因亚型Cap蛋白基因为SEQ ID.NO.1或其简并序列所示，所述猪圆环病毒3型Cap蛋白基因为SEQ ID.NO.2或其简并序列所示。

本发明还涉及一种疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物包括免疫量的上述的重组猪伪狂犬病病毒弱毒株和冻干保护剂。