[发明专利]一种以重组胶原蛋白为生物矿化模板制备微孔CaCO3 有效
| 申请号: | 201810198859.6 | 申请日: | 2018-03-12 |
| 公开(公告)号: | CN108358229B | 公开(公告)日: | 2021-09-10 |
| 发明(设计)人: | 肖建喜;何会霞;付彩虹 | 申请(专利权)人: | 兰州生物技术开发有限公司 |
| 主分类号: | C01F11/18 | 分类号: | C01F11/18;C12N15/70;C07K14/78;B82Y40/00 |
| 代理公司: | 北京力量专利代理事务所(特殊普通合伙) 11504 | 代理人: | 韩慧颖 |
| 地址: | 730030 甘肃省兰*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 重组 胶原 蛋白 生物 模板 制备 微孔 caco base sub | ||
1.一种以重组胶原蛋白为生物矿化模板制备微孔CaCO3纳米粒子的方法,其特征在于:该方法包括如下步骤:
(1)利用生物基因工程技术制备重组胶原蛋白;
(2)微孔CaCO3纳米材料的制备:
①重组胶原蛋白与碳酸钠和氯化钙均匀混合溶液的配制:在NaCO3的水溶液中加入0.1-120mg重组胶原蛋白粉末,混合均匀,再向该溶液中缓慢滴加氯化钙溶液;快速搅拌5-120min后,得到白色的絮状物;
②温和的生物矿化条件下制备纳米级微孔CaCO3:将所得絮状物放在20-37℃的恒温箱中,放置1-10天,得到白色沉淀;
③纯化并干燥保存制备的纳米材料:将产物通过离心分离,离心条件为12000rpm,弃去上清液,留下固体;并用去离子水分散固体,再离心纯化3-5次,在20-37℃恒温干燥箱中干燥即得;
所述的步骤(1)中重组胶原蛋白由以下步骤制备:
①确定重组胶原蛋白的序列:
重组胶原蛋白的序列为:
GSPGLPGPRGEQGPTGPTGPAGPRGLQGLQGLQGERGEQGPTGPAGPRGLQGERGEQGPTGLAGKAGEAGAKGETGPAGPQGPRGEQGPQGLPGKDGEAGAQGRPGKRGKQGQKGEKGEPGTQGAKGDRGETGPVGPRGERGEAGPAGKDGERGFPGERGVEGQNGQDGLPGKDGKDGQNGKDGLPGKDGKDGQNGKDGLPGKDGKDGQDGKDGLPGKDGKDGLPGKDGKDGQPGKPGKYGPPGPPGPPGPPGPPGPPGPPGPPGPPGPP;
②合成编码重组胶原蛋白的核酸:合成编码步骤①所述重组胶原蛋白的核酸,构建导入上述核酸的质粒,并将质粒转化大肠杆菌BL21-DE3菌株;
③重组胶原蛋白的制备与纯化。
2.根据权利要求1所述的一种以重组胶原蛋白为生物矿化模板制备微孔CaCO3纳米粒子的方法,其特征在于:步骤(2)中所述胶原蛋白质量分数为0.01-6wt%。
3.根据权利要求1所述的一种以重组胶原蛋白为生物矿化模板制备微孔CaCO3纳米粒子的方法,其特征在于:步骤(2)中第②步中所述的絮状物在25℃的恒温箱中放置2天。
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