[发明专利]一种鉴别砗磲卵子成熟度的方法

说明书

本发明公开了一种鉴别砗磲卵子成熟度方法。A、砗磲亲本选择：选择健康无损砗磲个体作为卵子成熟度的鉴别对象，将选好的砗磲清理干净暂养于海水中；B、性腺组织采集：利用注射器从砗磲出水孔伸入，插入其性腺表层组织，吸取性腺组织；C、成熟度鉴别：将收集的性腺组织进行显微观察，在显微镜下能观察到卵子熟度情况包括以下三种类型：卵未成熟期，卵呈泪滴或梨型，卵径未达到自然排放卵子规格；卵成熟期，圆形或椭圆形，卵径与排放卵子大小一致，卵黄物质积累丰富，双层卵膜，且相对光滑；卵过熟期，卵为圆形，双层卵膜发生褶皱，卵子容易破裂导致卵黄物质溢出。

技术领域：

本发明属于海洋生物技术中贝类遗传育种领域，具体的说是一种鉴别砗磲卵子成熟度的方法。

背景技术：

砗磲属于软体动物门瓣鳃纲帘蛤目砗磲科，主要分布在印度洋、西太平洋海域和南中国海的低潮区附近的珊瑚礁间或较浅礁内区域。在我国,主要砗磲物种包括库氏砗磲、无鳞砗磲、鳞砗磲、长砗磲、诺瓦砗磲、番红砗磲以及砗蚝属的砗蚝。随着潜水设备和机动船的普及，砗磲资源受到比较严重的破坏，如库氏砗磲在我国南海几乎灭绝，无鳞砗磲也变得极其罕见，其它的砗磲物种仍面临着濒危，而砗磲的人工繁育是解决资源短缺的最有效办法。

在砗磲人工繁殖中，配子质量直接关系到子代能否存活、种群繁衍生息。砗磲是一种雌雄同体雄性先熟的双壳贝类，繁殖期内雌雄配子共存于生殖性腺中。其中，精子只要处于运动状态大多处于成熟阶段，具有受精能力；而卵子的成熟度是决定合子质量的关键因素，但由于砗磲在外观上并无显著表型差异，故很难直接判断卵子成熟度。以往判别砗磲卵子是否成熟往往采用解剖的方式，杀死了大量的砗磲亲本，造成了严重的亲贝损耗。由此可见，开发一种无损伤鉴别砗磲卵子成熟度的方法对砗磲人工繁育具有重要的理论价值和应用前景。

发明内容：

为了解决当前砗磲卵子成熟度鉴别难的问题，本发明提供了一种鉴别砗磲卵子成熟度的方法，为砗磲人工繁育提供了优质的配子来源，为苗种生产提供可靠的技术保证。

本发明的鉴别砗磲卵子成熟度的方法，其特征在于，包括以下步骤：

A、砗磲亲本选择：选择健康无损砗磲个体作为卵子成熟度的鉴别对象，将选好的砗磲清理干净暂养于海水中；

B、性腺组织采集：利用注射器从砗磲出水孔伸入，插入其性腺表层组织，吸取性腺组织；

C、成熟度鉴别：将收集的性腺组织进行显微观察，在显微镜下可以观察到卵子熟度情况包括以下三种类型；卵未成熟期，一般呈泪滴或梨型，卵径未达到自然排放卵子规格；卵成熟期，通常是圆形或椭圆形，卵径与排放卵子大小一致，卵黄物质积累丰富，双层卵膜，且相对光滑；卵过熟期，卵为圆形，双层卵膜发生褶皱，卵子容易破裂导致卵黄物质溢出。

所述的砗磲亲本选择，是根据砗磲种类差异，挑选有雌性发生的个体。无鳞砗磲，壳长≥40cm，平均体重≥10kg；鳞砗磲，壳长≥30cm，平均体重≥2.5kg；长砗磲，壳长≥20cm，平均体重≥2kg；番红砗磲，壳长≥12cm，平均体重≥0.2kg；砗蚝，壳长在≥20cm，平均体重≥1.5kg。

所述的注射器优选为5mL塑料注射器。进一步优选是将使用5mL塑料注射器的针头替换为规格为0.6×100mm的针头，该规格的针头可以轻松从砗磲出水口伸入，插入性腺组织而不会损伤其他组织或器官；

所述的成熟度鉴别，根据显微镜下卵径将其分为未成熟、成熟和过熟3个时期。其中，自然排放卵子的卵径根据物种不同有差异，无鳞砗磲、鳞砗磲、长砗磲、诺瓦砗磲的卵径均为100μm，番红砗磲卵径为96μm，砗蠔卵径为120μm。

利用本发明的方法能够快速无损鉴别砗磲卵子成熟度，对砗磲人工繁育具有重要的理论价值和应用前景。

附图说明：