[发明专利]用于生物材料的澄清试剂和其用途

说明书

本申请涉及用于生物材料的澄清试剂和其用途。根据本发明的用于使生物材料透明的澄清试剂是含有作为活性组分的选自由尿素和尿素衍生物组成的组的至少一种化合物，以提供新颖的用于使生物材料透明的澄清试剂的溶液。

本申请是申请日为2011年03月11日，申请号为201180013354.4，发明名称为“用于生物材料的澄清试剂和其用途”的申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及用于使生物材料透明的澄清试剂(clearing reagent)和其用途。

背景技术

对于不透明组织的利用光学显微镜的内部观察来说，进行使用澄清试剂的预处理(用于使对象透明的澄清处理)。

作为澄清试剂和预处理方法的典型的例子，已经知道(i)在专利文献1和非专利文献1中由Ann-Shyn Chiang描述的Focus Clear(产品名称)溶液以及(ii)在非专利文献2中由Hans-Ulrich Dodt等人描述的组织澄清方法。这些都被用于使组织透明以用于对组织中存在的荧光物质的观察。

引用列表

[专利文献]

美国专利第6472216号(专利授权日：2002年10月29日)

[非专利文献]

非专利文献1

Ann-Shyn Chiang等人：Insect NMDA receptors mediate juvenile hormonebiosynthesis.PNAS 99(1)，37-42(2002)。

非专利文献2

Hans-Ulrich Dodt等人：Ultramicroscopy:three-dimensional visualizationof neuronal networks in the whole mouse brain.Nature Methods 4(4)，331-336(2007)。

发明概述

技术问题

Focus Clear溶液含有二甲亚砜(DMSO)和/或类似物作为用于使对象透明的活性组分，难以在活组织上使用。因此，可以对其应用Focus Clear溶液的对象主要地限于固定的样品。

此外，Focus Clear溶液具有非常复杂的组成，由此其制备是复杂的，并且其成本是非常高的。此外，虽然提出，Focus Clear溶液将允许使用荧光蛋白的观察，但是FocusClear溶液使神经组织收缩并且不足以使在深的区域的神经组织的混浊澄清。

同时，Dodt等人的组织澄清方法实质上要求在用于使对象透明的步骤中使用大量的有机溶剂。因此，该方法也难以在活组织上使用，并且可以对其应用该方法的对象主要地限于固定的样品。

此外，如上文描述的，因为组织澄清方法实质上要求使用大量的有机溶剂，所以该方法破环几乎所有的荧光蛋白。因而，使用该方法，难以进行使用荧光蛋白的组织观察。

此外，上文描述的组织澄清方法涉及经历澄清处理的组织的脱水，这是由于它们的组成的本质。然而，该过程导致组织的不可逆收缩。

作出本发明以解决以上的问题，并且本发明的一个目的是提供：新颖的用于使生物材料透明的澄清剂，所述澄清剂含有作为活性组分的具有较高的生物亲和性的组分；以及其用途。

问题的解决方案

为了解决以上的问题，本发明的发明人进行了努力的研究，得到了新的发现，即在具有优良的生物亲和性的组分中，尿素具有使生物材料透明的能力。基于这一点，本发明的发明人得出本发明。