[发明专利]检测抗白介素2受体亚基A天然抗体的多肽序列、试剂盒和方法

说明书

本发明涉及用于检测抗白细胞介素2受体亚基A(Anti‑interleukin‑2 receptor subunit alpha，AIL2RA)天然抗体的抗原多肽、包含该抗原多肽的试剂盒、使用该抗原多肽或该试剂盒检测人血浆中AIL2RA天然抗体浓度的方法、以及该抗原多肽或该试剂盒在检测人血浆AIL2RA天然抗体中的应用。本发明利用可与目标AIL2RA天然抗体完全互补的3种线性抗原多肽,分别实现对血浆中AIL2RA天然抗体的定性、定量检测，可用于区分富含AIL2RA天然抗体的血浆(阳性)和不含AIL2RA天然抗体的血浆(阴性)。

技术领域

本发明属于免疫学技术领域，涉及3种氨基酸序列的多肽抗原，可应用于制备酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)抗体检测试剂盒，用于检测血浆中抗白细胞介素2受体亚基A(Anti-interleukin-2receptor subunit alpha，AIL2RA)天然抗体浓度。

背景技术

恶性肿瘤是威胁整个人类健康的最主要杀手之一。基于灰霾雾霾等环境污染状况的持续存在，中国人群主要癌症的发病率呈逐年上升趋势。据统计，目前我国癌症平均每年发病率高达3/1000以上。肿瘤早期治疗手段，如手术切除或放射线治疗已发展的比较成熟，能够明显延长病人的存活时间。但是,如何预测肿瘤发病风险和早期诊断肿瘤是有效防治肿瘤的重要途径。

先前的研究表明，在恶性肿瘤体积发展到可用现代影像学技术检出之前3-5年，患者血中可出现高浓度抗肿瘤相关抗原的自身抗体。因此，检测血中肿瘤相关抗原自身抗体具有预测肿瘤发病风险和早期诊断肿瘤的重要价值。在国外,已有早期诊断肺癌和乳腺癌的诊断试剂盒市售。例如，由英国诺丁汉Oncimmune有限公司推出的Early CDT^TM-Lung诊断试剂盒已在北美和欧洲用于临床早期诊断肺癌近8年。然而，目前所报道的抗体检测方法敏感度相对低，特异性差，假阴性率高达60％以上。其中主要原因是由于每一种肿瘤相关抗原自身抗体在患者血中的阳性检测率平均在10％左右，即便是多种抗原混合，阳性检测率也难以突破50％。

近年来有关天然抗体研究报道显示，人血中50％以上的抗体属于天然抗体，主要由B1淋巴细胞产生,不需要特异性抗原刺激。天然抗体参与机体的各种生理调节和免疫功能稳定,并且充当固有免疫和特异免疫系统之间的桥梁。值得注意的是，某些天然抗体具有免疫监视功能，随时清除体内形成的恶性变细胞,以维持内环境稳定。因此，保持一定水平的天然抗体可以起到防癌作用。据此推测，天然抗体缺乏或阴性者发生肿瘤的风险可能明显高于正常人群。大量的研究工作证明，调节性T细胞(Regulatory T cells，Treg细胞)与肿瘤免疫逃逸机制密切相关。在肺癌、乳腺癌、卵巢癌及黑色素瘤患者的外周血淋巴细胞和肿瘤浸润淋巴细胞群中，Treg细胞比例增高现象。Treg细胞通过直接接触细胞或通过释放细胞因子，抑制效应性CD4⁺和CD8⁺T细胞活化与增殖发挥。例如，Treg细胞抑制肿瘤特异性抗原激活的CD4⁺效应细胞分泌IL-2，并在肿瘤微环境中能限制CD8+T细胞毒性颗粒释放，使肿瘤细胞逃逸免疫系统的杀伤。