[发明专利]丝素水凝胶包裹的过表达ncRNA的MSC外泌体制备方法与在抗后肢衰老中的应用在审
| 申请号： | 201810140513.0 | 申请日： | 2018-02-11 |
| 公开（公告）号： | CN110144324A | 公开（公告）日： | 2019-08-20 |
| 发明（设计）人： | 李杨欣;韩超珊 | 申请（专利权）人： | 苏州大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;A61K9/06;A61P39/00;A61P9/10 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 常亮 |
| 地址： | 215104 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 水凝胶 后肢 丝素 衰老 丝素蛋白水凝胶 生物技术领域 细胞外基质 转运 应用 滞留 细胞 释放 传递 | ||
1.过表达ncRNA的外泌体，其特征在于，所述ncRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞。
2.权利要求1所述过表达ncRNA的外泌体的制备方法，其特征在于，由miRNAmimics转染间充质干细胞后，经培养制得；所述ncRNA的序列如SEQ ID NO:1所示；所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞。
3.根据权利要求1所述的外泌体，其特征在于，所述培养采用去除外泌体的含有10％胎牛血清的α-MEM培养基。
4.根据权利要求1所述的外泌体，其特征在于，所述培养后，收集上清液经分离获得过表达miRNA的外泌体。
5.权利要求1所述的外泌体或权利要求2～4任一项所述制备方法制备的外泌体在制备促进缺血组织血流恢复和/或抗衰老的制剂中的应用。
6.一种促进缺血组织血流恢复和/或抗衰老的制剂，其特征在于，包括由丝素蛋白和过表达miRNA的外泌体制得的凝胶；
所述过表达ncRNA的外泌体为权利要求1所述的外泌体或权利要求2～4任一项所述制备方法制备的外泌体。
7.根据权利要求6所述的制剂，其特征在于，所述丝素蛋白与外泌体的质量比为20:0.55。
8.权利要求6或7所述制剂的制备方法，其特征在于，将丝素蛋白水溶液经3次30％强度的超声，每次超声30s，然后与权利要求1所述的外泌体或权利要求2～4任一项所述制备方法制备的外泌体混合，35℃～40℃放置5min～10min，制成凝胶制剂。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述丝素蛋白水溶液的浓度为0.04g/mL。
10.根据权利要求8或9所述制剂的制备方法，其特征在于，所述丝素蛋白水溶液的体积与外泌体的质量比为0.5mL：0.55mg。
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