[发明专利]一种分离富集环境水样中痕量雌激素的方法

说明书

本发明公开了一种分离富集环境水样中痕量雌激素的方法。采用高内相乳液聚合技术合成具有亲水性的甲基丙烯酸甲酯MMA‑二乙烯苯DVB‑反式丁烯二酸TBA高内相乳液聚合整体柱，即MMA/DVB/TBA polyHIPE整体柱；将20 mL目标环境水样在蠕动泵或高压泵的作用下以2 mL/min的流速通过合成的MMA/DVB/TBA polyHIPE整体柱，萃取并富集目标环境水样中存在的痕量雌激素，然后采用体积百分比浓度为20%的甲醇水溶液作为清洗剂清洗MMA/DVB/TBA polyHIPE整体柱，除去吸附力小的干扰物质，继而采用体积比为1:9的乙酸/乙腈混合溶液洗脱富集在MMA/DVB/TBA polyHIPE整体柱上的雌激素目标物，收集洗脱液，将洗脱液通过有机滤膜后，放入进样瓶，上机测定，即实现对环境水样中痕量雌激素的分离富集。

技术领域

本发明属于分析化学样品前处理技术领域，特别涉及一种分离富集环境水样中痕量雌激素的方法。该方法制备出一种高内相乳液聚合物整体柱，适用于环境水样及其他复杂基体中痕量雌激素目标物的分离、富集和纯化。

背景技术

雌激素(estrogen)又称雌性激素、女性激素，是一类主要的女性荷尔蒙。在女性身体中，通常通过卵巢与胎盘产生，少量一部分通过人体肾上腺皮质与肝分泌而来。雌激素可分为天然雌激素与合成雌激素两大类，其中，天然雌激素由人体分泌而来，主要包括：雌二醇、雌三醇、雌酮等；合成雌激素主要为与雌二醇结构相似的类固醇衍生物,其中包括：乙烯雌酚、炔雌醇等。雌激素刺激人的中枢伸进会影响人的情绪、心理、内分泌，且对人体的影响具有两面性，首先，雌激素作为卵泡发育的直接刺激因素，直接影响了卵巢的功能。分泌充足的雌激素能够使女性的乳腺、子宫、皮肤得到显著的改善，甚至可以降低血管中血液的压力，减少心血管疾病突发的几率^[1]。其次，当雌激素分泌过量或食入过多的雌激素时，会导致女性内分泌紊乱、受到妇科病甚至是乳腺癌的危害^[2]。同时，雌激素并非为女性的专属，男性常常通过食入一些激素超标的食品使自身的雌激素过高，会引起男性雄性激素的分泌，内分泌紊乱，导致男性患上睾丸癌等疾病。因此，近年来，对于雌激素的分析检测越来越受到人们广泛的关注^[3]。

目前，雌激素的检测方法主要有高效液相色谱法-紫外检测法，高效液相色谱-安培法、高效液相色谱法-质谱联用法、酶联免疫法毛细管电泳法等。高效液相色谱法紫外检测，采用高效液相色谱法–紫外检测法进行分析检测，有助于提高雌激素残留检测的灵敏度^[3,4]。

固相萃取(Solid Phase Extraction，SPE)是一个由柱色谱分离过程、分离机理、固定相和溶剂的选择等组成的试样预处理技术，其利用固体吸附剂吸附液体样品中的目标物，使目标物与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱，最终达到分离和富集目标物的目的。SPE具有操作时间短、样品量小、不需萃取溶剂、适于分析挥发性与非挥发性物质、重现性好等优点.对环境化学、食品、医药卫生、临床化学、生物化学、法医学等领域中复杂目标物样品微量或痕量的分离、富集和分析做出了巨大的贡献^[5]。

高内相乳液[High Internal Phase Emulsion(HIPE)]，是一种水包油(O/W)或油包水(W/O)两相体系，其中分散相的体积分率在74％以上，甚至达到99％^[6]。制备高内相乳液整体柱的过程中，可通过改变乳液材料的单体种类、单体种类、乳液材料的相比等精确控制孔的大小和分布，且高内相乳液整体柱具有高孔隙率、高比表面积、低密度、很好的物质输送能力以及重现性好的特点，在分离介质、吸收材料、生物组织工程、催化剂载体等领域显示出较好的应用前景^[6-8]。

参考文献

[1]闫懿,宋健,敖锋.雌激素补充治疗心血管疾病的研究进展[J].中西医结合心脑血管病杂志,2016,14(20),2375-2378.