[发明专利]一种仙客来杂交育种方法

说明书

本发明公开了一种仙客来杂交育种方法，其包括以下步骤：通过对仙客来的柱头可授性以及花粉生活力测定，得到准确采集花粉时间和授粉时期：母本在开花后4～5天柱头可授性最强，花瓣由向上聚拢至刚刚展开，花药及其花柱朝下生长，花瓣及萼片朝上生长，花粉呈纯黄色父本同样在开花4～5天时花粉生活力较强。采集开花4～5天的父本花粉，授于开花4～5天的母本柱头上，5个月后果实成熟，采摘果实并收集种子保存。本发明通过花朵开放状态准确判断花粉最佳采集时期以及柱头最佳可授时期确定最佳授粉时间，同时优化去雄手法，提高授粉成功率并缩减授粉次数，大大提高了仙客来人工授粉的效率，为加快仙客来种质资源创新和新品种选育奠定了基础。

技术领域

本发明涉及杂交育种领域，尤其涉及一种仙客来杂交育种方法。

背景技术

仙客来别名萝卜海棠、兔耳花、兔子花、一品冠、篝火花、翻瓣莲，是报春花科仙客来属多年生草本植物。20世纪中期以后，在我国发展迅猛，在栽培、育种、繁殖、病虫害防治等方面都有很大程度上的进步。仙客来作为十大盆花之一，花期长达5个月，适逢圣诞节、元旦、春节等节日，市场需求量巨大。目前我国大多数仙客来花卉企业主要依靠购买荷兰、日本等国家的进口种子进行种植，成本较高，因此提高仙客来人工授粉效率对于仙客来新品种选育和制种具有重要的意义。仙客来花朵从未展开状态(完全聚拢)到完全展开状态(花瓣由聚拢到向上翻卷至完全展开，花药及其花柱朝下生长，花瓣及萼片朝上生长)的时期较长，不易准确判断其授粉时间，需要多次授粉，效率较低。准确判断母本最佳授粉时间、父本花粉最佳采集时间是提高仙客来人工授粉效率的重要途径之一。

发明内容

鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供的一种仙客来杂交育种方法，其包括以下步骤：

A、花粉采集：采集‘猩红’、‘红眼黄’仙客来开花0天(花瓣完全聚拢)、开花4～5天(花瓣由向上聚拢至刚刚展开，花药及其花柱朝下生长，花瓣及萼片朝上生长，花粉呈纯黄色)、开花9～10天(花瓣由聚拢到向上翻卷至完全展开，花药及其花柱朝下生长，花瓣及萼片朝上生长，存在部分白色花粉)3种不同开花状态的花朵，将花朵在密闭、干燥的条件下放置一天，摘除花瓣，将花粉弹落在硫酸纸上，采集到的花粉用于花粉生活力测定；

B、花粉生活力测定：采用离体萌发法和TTC染色法对‘猩红’、‘红眼黄’仙客来不同开花状态的花粉进行花粉生活力测定。将制备好的培养基趁热滴1～2滴于擦拭干净的凹面载玻片上；培养基包括5％的硼酸，10％的蔗糖，1％的琼脂，待冷却后，用解剖针蘸取少量花粉均匀洒在培养基上，盖上盖玻片，将载玻片放入铺有湿润滤纸的培养皿中，移入25℃之黑暗条件的培养箱中进行培养。在2h、4h、6h、8h时分别取出载玻片，放在10×10倍显微镜下观察，对每个载玻片随机选取5个视野统计花粉萌发数，以花粉管伸出超过花粉粒直径时为发芽标准，计算花粉萌发率；在凹面载玻片上，滴1～2滴0.5％TTC染色液，用解剖针将花粉均匀散落在染色液中，搅拌均匀，盖上盖玻片，置于35℃培养箱中进行暗培养，15min后在10×10倍显微镜下观察拍照，每个品种3～4个凹槽，每个凹槽观察不少于6个视野，在显微镜下观察花粉着色情况，选择清晰的、花粉排列均匀的视野进行拍照，统计并计算花粉的染色率；

萌发率(％)＝(花粉萌发个数/观察花粉总数)×100％

染色率(％)＝(红色花粉数+淡红色花粉数)/观察花粉总数×100％