[发明专利]一种用于鉴别与检测肝癌细胞的点亮型荧光探针有效
| 申请号: | 201810129580.2 | 申请日: | 2018-02-08 |
| 公开(公告)号: | CN108444959B | 公开(公告)日: | 2020-09-11 |
| 发明(设计)人: | 陈笛笛;毛慧灵;张亚会;董宇平 | 申请(专利权)人: | 北京理工大学 |
| 主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
| 代理公司: | 北京理工大学专利中心 11120 | 代理人: | 杨志兵;仇蕾安 |
| 地址: | 100081 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 鉴别 检测 肝癌 细胞 点亮 荧光 探针 | ||
1.一种用于鉴别与检测肝癌细胞的点亮型荧光探针,其特征在于:所述荧光探针是由ZZ-HPB-NC、二甲基亚砜以及高糖DMEM培养基配制而成的混合溶液;
其中,先将ZZ-HPB-NC溶解于二甲基亚砜中配制成1×10-4mol/L~1×10-2mol/L的溶液a;再向溶液a中加入高糖DMEM培养基,得到浓度为1×10-8mol/L~1×10-5mol/L的溶液b,即为所述荧光探针;
所述肝癌细胞的种类为HepG2 cell、Hep3B cell或SMMC7721 cell;所述ZZ-HPB-NC为2,2'-((((1Z,3Z)-1,2,3,4-四苯基-1,3-丁二烯-1,4-)二(4,1-苯基))二乙烯基-(2-氰基)乙酸甲酯。
2.根据权利要求1所述的一种用于鉴别与检测肝癌细胞的点亮型荧光探针,其特征在于:所述荧光探针适用于鉴别与检测的肝癌细胞种类为HepG2 cell、Hep3B cell或SMMC7721 cell,鉴别与检测的具体操作步骤如下:
将肝癌细胞以及正常肝细胞传代至培养皿中,并置于细胞培养箱中培养12h~24h;随后,移除培养基,再向培养皿中加入溶液b,静置染色5min~10min后吸出培养基,洗涤,再加入高糖DMEM培养基后置于荧光显微镜下观察,具有点亮荧光标记效应的细胞即为肝癌细胞;
所述正常肝细胞的种类为L02 cell或QSG7701 cell。
3.根据权利要求2所述的一种用于鉴别与检测肝癌细胞的点亮型荧光探针,其特征在于:所述细胞培养箱中的培养环境:温度为37℃,CO2的体积分数为5%。
4.根据权利要求2所述的一种用于鉴别与检测肝癌细胞的点亮型荧光探针,其特征在于:采用pH=7.4的磷酸盐缓冲液进行洗涤,洗涤次数为2~3次。
5.根据权利要求2所述的一种用于鉴别与检测肝癌细胞的点亮型荧光探针,其特征在于:对于底面积为1cm2的培养皿,溶液b加入的体积为0.037mL~0.125mL,高糖DMEM培养基加入的体积为0.125mL~0.250mL。
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