[发明专利]一种用于鉴别与检测肝癌细胞的点亮型荧光探针有效

专利信息
申请号: 201810129580.2 申请日: 2018-02-08
公开(公告)号: CN108444959B 公开(公告)日: 2020-09-11
发明(设计)人: 陈笛笛;毛慧灵;张亚会;董宇平 申请(专利权)人: 北京理工大学
主分类号: G01N21/64 分类号: G01N21/64
代理公司: 北京理工大学专利中心 11120 代理人: 杨志兵;仇蕾安
地址: 100081 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 鉴别 检测 肝癌 细胞 点亮 荧光 探针
【权利要求书】:

1.一种用于鉴别与检测肝癌细胞的点亮型荧光探针,其特征在于:所述荧光探针是由ZZ-HPB-NC、二甲基亚砜以及高糖DMEM培养基配制而成的混合溶液;

其中,先将ZZ-HPB-NC溶解于二甲基亚砜中配制成1×10-4mol/L~1×10-2mol/L的溶液a;再向溶液a中加入高糖DMEM培养基,得到浓度为1×10-8mol/L~1×10-5mol/L的溶液b,即为所述荧光探针;

所述肝癌细胞的种类为HepG2 cell、Hep3B cell或SMMC7721 cell;所述ZZ-HPB-NC为2,2'-((((1Z,3Z)-1,2,3,4-四苯基-1,3-丁二烯-1,4-)二(4,1-苯基))二乙烯基-(2-氰基)乙酸甲酯。

2.根据权利要求1所述的一种用于鉴别与检测肝癌细胞的点亮型荧光探针,其特征在于:所述荧光探针适用于鉴别与检测的肝癌细胞种类为HepG2 cell、Hep3B cell或SMMC7721 cell,鉴别与检测的具体操作步骤如下:

将肝癌细胞以及正常肝细胞传代至培养皿中,并置于细胞培养箱中培养12h~24h;随后,移除培养基,再向培养皿中加入溶液b,静置染色5min~10min后吸出培养基,洗涤,再加入高糖DMEM培养基后置于荧光显微镜下观察,具有点亮荧光标记效应的细胞即为肝癌细胞;

所述正常肝细胞的种类为L02 cell或QSG7701 cell。

3.根据权利要求2所述的一种用于鉴别与检测肝癌细胞的点亮型荧光探针,其特征在于:所述细胞培养箱中的培养环境:温度为37℃,CO2的体积分数为5%。

4.根据权利要求2所述的一种用于鉴别与检测肝癌细胞的点亮型荧光探针,其特征在于:采用pH=7.4的磷酸盐缓冲液进行洗涤,洗涤次数为2~3次。

5.根据权利要求2所述的一种用于鉴别与检测肝癌细胞的点亮型荧光探针,其特征在于:对于底面积为1cm2的培养皿,溶液b加入的体积为0.037mL~0.125mL,高糖DMEM培养基加入的体积为0.125mL~0.250mL。

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