[发明专利]一种抗苗勒氏管激素的磁微粒化学发光免疫分析试剂盒

说明书

本发明属于临床免疫诊断领域，具体的公开提供了一种抗苗勒氏管激素的磁微粒化学发光免疫分析试剂盒，该磁微粒化学发光免疫分析测定试剂盒：AMH标准品；碱性磷酸酶标记的AMH抗体，异硫氰酸荧光素标记的AMH抗体；抗异硫氰酸荧光素单克隆抗体包被的磁微粒溶液；化学发光底物；AMH质控品；清洗液浓缩液。分装上述标准品、磁微粒溶液、混合液、样品稀释液、洗液、化学发光底物，反应管。该试剂盒是磁微粒分离技术、酶标记技术、化学发光检测技术的组合，使得能够以准确度高、精密度好、成本低地对血清或血浆中的抗苗勒氏管激素进行定量的检测。

技术领域

本发明属于临床免疫诊断领域，具体属于一种抗苗勒氏管激素的磁微粒化学发光免疫分析试剂盒。

背景技术

抗苗勒氏管激素（anti-Mullerianhorme，AMH），也称作苗勒氏管抑制物（Mullerian inhibiting substance，MIS），是转化生长因子-β家族的成员之一，主要由小卵泡及窦前卵泡的卵巢颗粒细胞分泌，由两个相同的70KD亚基通过二硫键形成的二聚体糖蛋白，相对分子质量为140×10³，大量的学术研究表明，AMH在女性体内由卵巢中颗粒细胞直接分泌，是女性早期卵泡的直接产物，浓度最高为窦腔小卵泡和窦前卵泡时期，而在大卵泡时期，AMH的表达逐渐下降。

苗勒氏管作为输卵管、子宫和大部分阴道的起源，在女性中持续存在，其浓度水平可以反映整个生命周期中卵泡的活性，可明白卵巢的储存量。女性随着年龄的增长，自身卵巢功能下降，血清AMH水平也逐渐下降。相比于滤泡刺激素(FSH)水平、抑制素B(INH)水平和窛卵泡的数目等传统的评价女性卵巢功能的指标，AMH在检测者月经周期中保持恒定，血清AMH的水平不会随着性腺激素的波动而变化，因此AMH的检测不受女性月经周期的制约，可以随时检测，解决了目前妇产生殖科面临的主要问题之一。现今AMH已作为预测女性卵巢储备能力的指标。此外，血清AMH浓度水平检测，还有助于提高辅助生殖技术中促排卵方案的成本效益，并与体外授精联合胚胎移植技术中的临床妊娠率和活产率息息相关。

发明内容

本发明需要解决的技术问题在于提供一种抗苗勒氏管激素的磁微粒化学发光免疫分析试剂盒，该试剂盒可适于产业化规模生产，市场应用前景。

本发明的试剂盒，其特征在于所述的试剂盒包括：AMH标准品；碱性磷酸酶标记的AMH抗体，异硫氰酸荧光素标记的AMH抗体；抗异硫氰酸荧光素单克隆抗体包被的磁微粒固相载体；化学发光底物溶液；AMH质控品；清洗液浓缩液。分装上述标准品、磁微粒溶液、混合液、样品稀释液、洗液、化学发光底物，反应管。

本发明的技术需要的解决方案，检测分析的操作步骤具体如下：

（1）加样、免疫反应：首先，在反应管中加入50μL的不同浓度梯度的标准品、质控品、待测样本，加入45μL碱性磷酸酶标记的AMH抗体，30μL的异硫氰酸荧光素标记的AMH抗体；然后加入45μL抗异硫氰酸荧光素单克隆抗体包被的磁微粒固相载体，在振荡器上振荡30秒，混匀之后，于37℃的恒温水浴锅中孵育30分钟；

（2）洗涤操作：将反应管置于磁架上静置3分钟，后缓慢倒出上清液，之后将反应管及磁架同时倒置于吸水纸上拍干；每管中加入200μL的清洗液，振荡30秒，将反应管置于磁架上静置3分钟，后缓慢倒出上清液，将试管及磁架一同倒置在吸水纸上拍干；重复上述清洗操作5次；

（3）加入化学发光底物溶液：每管中分别加入200μL的发光底物，后放入化学发光免疫分析仪中；

（4）读取化学发光值：用化学发光测定仪测定每管的发光值。

本技术方案的有益效果在于：

（1）本发明操作简单，操作用时短，无需添加终止液及长时间显色，将免疫反应与化学发光检测技术结合，具有灵敏度高、特异性好，能快速、简便地适用于人血清、血浆中的抗苗勒氏管激素的定量检测；