[发明专利]一种食品过敏原特异性IgE检测试剂盒及其应用

说明书

本发明提供了一种食品过敏原特异性IgE检测试剂盒及其应用，所述试剂盒包括磁微粒、食品过敏原、酶标抗人IgE抗体和底物；其中，所述食品过敏原修饰有生物素，所述酶标抗人IgE抗体修饰有碱性磷酸酶。本发明的试剂盒中各试剂组分稳定性良好，有效期长，灵敏度高、准确性好、检测时间短。

技术领域

本发明属于免疫分析领域，涉及一种食品过敏原特异性IgE检测试剂盒及其应用，尤其涉及一种花生过敏原特异性IgE检测试剂盒及其应用。

背景技术

IgE抗体介导的I型过敏性疾病是最常见的变态反应性疾病之一，是全球性的重大卫生问题，被世界卫生组织列为二十一世纪重点防治的三大疾病之一。全球范围内变态反应性疾病的总发病率约为15-30％，我国大约有5-10％的人受到过敏原的袭扰。

患者吸入、摄食入或者注入含有致敏成分的过敏原或变应原后，机体B细胞产生特异性免疫球蛋白E(IgE)，从而引发过敏性反应。在过敏性哮喘、枯草热、荨麻疹、过敏性鼻炎、湿疹、结膜炎、胃肠道I型过敏性疾病及严重过敏性反应中，IgE抗体具有关键作用，检测特异性IgE抗体对于诊断过敏性疾病具有重要意义。

目前，花生(F13)过敏原特异性IgE抗体的检测试剂主要以国外进口试剂为主，价格昂贵，较难普及。国内仅有一家企业取得花生(F13)过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒的注册号，市场前景良好，具有很大的发展空间。

CN 102331495A公开了食物过敏原检测试剂盒及其制备方法，包括显色液A、显色液B，终止液，酶标抗IgE抗体，聚苯乙烯微孔板上包被有生物素化牛血清白蛋白-链霉亲和素，生物素化过敏原，所述试剂盒在生物素化过敏原与血清中特异性抗体结合的同时，与链霉亲和素结合，实现了包被和反应的同步进行，然而采用的辣根过氧化物酶发光体系灵敏度较差，不能满足痕量IgE的检测要求。

因此，提供一种灵敏度高、特异性强、成本低的食品过敏原IgE检测试剂盒，在过敏性疾病诊断领域具有重要意义。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种食品过敏原特异性IgE检测试剂盒及其应用，所述试剂盒准确性好、灵敏度高、检测时间短、成本低。

为达此目的，本发明提供以下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种食品过敏原特异性IgE检测试剂盒所述试剂盒包括磁微粒、食品过敏原、酶标抗人IgE抗体和底物；

其中，所述食品过敏原修饰有生物素，所述酶标抗人IgE抗体修饰有碱性磷酸酶。

本发明的试剂盒以磁微粒为固相载体，比表面积大，提高了食品过敏原在磁微粒表面的包被量；采用生物素-链霉亲和素体系，将食品过敏原结合在磁微粒表面，亲和力强、稳定性好，进一步提高了磁微粒表面食品过敏原的包被量；结合化学发光体系，增强了检测体系的特异性和灵敏度，保证了样本中微量的IgE抗体能够被检测到。

优选地，所述磁微粒修饰有链霉亲和素。

优选地，所述磁微粒的浓度为0.1-2.0mg/mL，例如可以是0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL、0.5mg/mL、0.6mg/mL、0.7mg/mL、0.8mg/mL、0.9mg/mL、1.0mg/mL、1.1mg/mL、1.2mg/mL、1.3mg/mL、1.4mg/mL、1.5mg/mL、1.6mg/mL、1.7mg/mL、1.8mg/mL、1.9mg/mL或2.0mg/mL，优选为0.3-1.2mg/mL。

本发明以生物素-链霉亲和素独特的结合特性为基础，结合二者可以偶联抗原抗体等生物大分子的性质，将生物素化食品过敏原偶联于链霉亲和素化磁微粒表面，与抗原-抗体特异性结合相比，生物素-链霉亲和素亲和力强、空间位阻小、稳定性高、专一性好，1分子亲和素可以结合4分子生物素，具有多级放大效应，显著提高了检测体系的稳定性、特异性和灵敏度。