[发明专利]一种采用EMS诱变剂创制红芸豆突变体的方法及应用

说明书

本发明属于芸豆育种技术领域，具体涉及一种采用EMS诱变剂创制红芸豆突变体的方法及应用。包括种子预处理、诱变处理和播种栽培，其中诱变处理步骤为：将无菌种子交替浸泡于植物生长调节剂和体积分数0.01‑0.05％的EMS溶液中，其中植物生长调节剂的浸泡时间为5‑10min，EMS溶液的浸泡时间是植物生长调节剂的两倍；交替次数为2‑5次；吸干种子表面水分，得到一级诱变种子；用射线辐射一级诱变种子，得二级诱变种子；播种栽培，筛选出红芸豆突变体。本发明的方法为红芸豆专用高效诱变方法，提高诱变效率，减少EMS等致癌物的用量，减少对育种工作者的健康威胁。

技术领域

本发明属于芸豆育种技术领域，具体涉及一种采用EMS诱变剂创制红芸豆突变体的方法及应用。

背景技术

红芸豆是豆科被子植物门，颗粒硕大、色泽鲜艳，兼有营养和药用价值，营养健康。红芸豆中富含花色苷和皂苷，可降低关节局部炎性组织的含量，具有明显的抗炎作用，对关节炎患者可起到消炎镇痛的效果。红芸豆是我国山西的特产，岢岚县全县红芸豆种植面积达13万亩，可出口创汇350万美元，大大增加了农民收入。保持现有红芸豆品质，开发新的红芸豆品种和品系是农业科学工作者的重要目标。

传统的红芸豆育种方法采用杂交育种方式，即选择具有优良性状的红芸豆父本和母本进行杂交，经历数代后最终选择性状优良的品种。因此利用诱变剂诱变育种的方法逐渐被使用。

EMS是常用的植物诱变剂，EMS属于烷化剂的一种，诱变效率高，现有技术中，EMS诱变剂常用体积分数为0.1-1.0％，但是该物质具有强烈的致癌性和挥发性，使用时，必须做严格的防护工作，否则对育种工作者的身体健康存在严重威胁。因此，开发一种红芸豆专用的EMS诱变剂在保证高效诱变效率的同时减少EMS的用量，在红芸豆育种方面具有重要的意义。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供的一种采用EMS诱变剂创制红芸豆突变体的方法及应用，利用红芸豆专用的EMS诱变剂对红芸豆种子进行诱变，在保证高效诱变效率的同时减少EMS的用量，创制出红芸豆突变体，为红芸豆品种的选育奠定了基础。

本发明的第一个目的是提供一种采用EMS诱变剂创制红芸豆突变体的方法，包括以下步骤：

S1，种子预处理

选择红芸豆种子进行消毒处理，然后浸泡于20-30mg/L赤霉素溶液中2-3h，得到无菌种子；

S2，诱变处理

将无菌种子交替浸泡于植物生长调节剂和体积分数0.01-0.05％的EMS溶液中，其中植物生长调节剂的浸泡时间为5-10min，EMS溶液的浸泡时间是植物生长调节剂的两倍；交替次数为2-5次；吸干种子表面水分，得到一级诱变种子；

用射线辐射一级诱变种子，得二级诱变种子M0代；

S3，播种栽培

将二级诱变种子M0代浸泡于生根剂中1-2h，吸干种子表面水分，田间播种栽培，筛选出性状发生突变的单株，收获M1代种子；分别田间种植M1代种子和未经诱变的红芸豆种子，田间观察植株性状，筛选出与未经诱变的红芸豆种子性状不同的突变株，得M2代种子，M2代种子作为红芸豆突变体。

优选的，上述采用EMS诱变剂创制红芸豆突变体的方法，S2中，所述植物生长调节剂为赤霉素、细胞分裂素、萘乙酸和6-苄基氨基嘌呤中任一种或几种的组合。

优选的，上述采用EMS诱变剂创制红芸豆突变体的方法，S2中，所述植物生长调节剂的浓度为80-150mg/L。

优选的，上述采用EMS诱变剂创制红芸豆突变体的方法，S2中，所述射线是⁶⁰Coγ射线或者¹³⁷Csγ射线，辐射剂量率为1Gy/min，辐射剂量为30Gy。