[发明专利]用于热循环的可密封微流体芯片

说明书

本公开内容涉及用于疑似含有目标核酸的水性样品热孵育的微流体芯片的可逆密封。微流体芯片含有流动通道和多个反应室，其中通过可以被密封剂密封的入口接受样品和置换流体的进入，所述密封剂具有高于室温的熔点。

发明领域

本发明属于进行生物学或生物化学测定的分析系统领域。在该领域中，其涉及用于疑似含有目标核酸的水性样品热孵育的微流体芯片的可逆密封。

背景技术

热孵育已经成为在基础研究和临床诊断中的众多分析过程的先决条件。诸如聚合酶链式反应(PCR)之类的方法依赖于精确定义的一系列加热步骤或者加热和冷却步骤(通常称为热循环)，以便使流体样品经受诱导反应的特定部分的加热条件。例如，大多数双链模板DNA(dsDNA)的单链定量变性通常需要高于90℃的温度，而相应寡核苷酸的退火通常在约50至65℃之间的相当低的温度下进行。

此类反应可以在单一试管中，在多个此类单独的试管中或者在诸如多孔板之类的集成排布中进行。后者通常使得通量增加和工作流程简化，因为可以在单一工作步骤中将给定样品分配到相当多的反应室中。

可以将此类板以微流体芯片的形式排布，其中使用内部流动通道将流体样品分配到多个反应室，例如整合至流动通道内壁的微孔中。

针对各反应室和流动通道对此类微流体芯片进行有效的密封可能是具有挑战性的，其取决于样品和/或应用的类型。存在多种方法，如物理覆盖物、盖子、帽、键合/胶合箔或膜，或者液体密封如PDMS或胶水。

US 6,143,496提供了一种方法，其公开了向流动通道加入置换流体(如油)，从而从中除去水性样品并覆盖位于下方的样品室。

发明概述

在本申请所述的第一个方面中，描述了用于热孵育疑似含有目标核酸的水性样品的方法。

简言之，提供了具有含有多个反应室的内部流动通道的微流体芯片。通过入口将水性样品引入流动通道并最终进入反应室，在该步骤之后，加入置换流体以便从流动通道中除去过量的水性样品，从而将反应室中新形成的样品分隔物彼此之间流体分离。

然后将熔点高于室温的密封剂以液体形式施加到入口，在入口处其能够在低于其熔化温度的温度下固化，以密封端口。

然后将由此制备的微流体芯片转移至热孵育站并进行一系列加热步骤，其中密封剂再次熔化，从而使得在微流体芯片的内部与外部之间的气体交换和压力平衡。

水性样品具有比密封剂更高的密度。

本申请公开的另一个方面是具有含有多个反应室的内部流动通道的微流体芯片。芯片还具有与流动通道连接的入口，其中入口具有熔点高于室温的密封剂，所述密封剂以固体形式附着在内壁上。除非将其熔化再固化以覆盖入口，否则将其设置成不阻碍液体流动通过入口。

本申请还描述了使用微流体芯片的试剂盒和分析系统。

附图简述

图1示出了本申请所述的微流体芯片的透视图。

图2以横截面侧视图示意性描述了本申请所述的微流体芯片(1)针对水性样品和置换流体的装填程序。

图3示出了在入口(6)中施加密封剂的三个不同实施方式的示意性横截面侧视图。

图4提供了本申请所述的分析系统(40)的示意图。

发明详述

本申请所述的第一个方面是一种用于热孵育疑似含有目标核酸的水性样品的方法，所述方法包括步骤：

a.提供微流体芯片，所述微流体芯片包含在上板与下板之间的流动通道，流动通道在上板和/或下板的内壁上与多个反应室流体连接；