[发明专利]一种适用于高海拔低温环境的耐砷菌株及基于该菌株制备微生态制剂的发酵方法

权利要求书

1.一种能够适用于低温环境的耐砷菌株，其特征在于，所述耐砷菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC No.14767，命名为短芽孢杆菌(Brevibacillus sp.)1-5菌株。

2.基于权利要求1所述耐砷菌株制备微生态菌剂的固体发酵方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)将麦麸、草炭、硅藻土按质量比5—9:1.5—2.5:1混和均匀，得混合物，向混合物中加入质量为混合物质量1—1.5倍的蒸馏水，调节pH至7，高温灭菌，得混合培养基；

(2)挑取耐砷菌株接种到LB液体培养基中，于28℃下震荡培养，培养至菌液OD₆₀₀值为0.3—0.7时取培养液，将培养液与LB液体培养基按体积比1:18至1:22的比例混匀，于37℃下震荡培养20—28h，获得种子菌液；

(3)将种子菌液按10％的接种量接种到混合培养基中，于25—37℃下培养45—50h，至复合物中的活菌数达到4.0×10¹⁰cfu/g，得达到活菌数要求的菌剂，将菌剂干燥至含水量≤5％，即得耐砷菌微生态菌剂。

3.基于权利要求1所述耐砷菌株制备微生态制剂的液体发酵方法，其特征在于，所述方法是将耐砷菌株接种至液体培养基，于37℃、转速180rpm条件下发酵培养20—28h，得发酵液，即为耐砷菌微生态菌剂；或者，将发酵液进行干燥后得干燥物，即为耐砷菌微生态菌剂；所述液体培养基基配方为：LB肉汤20—30g/L，七水硫酸亚铁40—50g/L，硫酸铵2—5g/L，硫酸氢二钾0.3—0.7g/L，七水硫酸镁0.3—0.7g/L，氯化钾0.08—0.12g/L，硝酸钙0.008—0.012g/L，自然pH。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述液体培养基基配方为：LB肉汤25g/L，七水硫酸亚铁45g/L，硫酸铵3g/L，硫酸氢二钾0.5g/L，七水硫酸镁0.5g/L，氯化钾0.1g/L，硝酸钙0.01g/L，自然pH。