[发明专利]用于增溶目标蛋白质的组合物及其用途

说明书

本发明涉及一种含有包含启动子和对伴娘蛋白与RNA结合域的融合蛋白进行编码的基因的表达盒或包含所述表达盒的表达载体的用于增溶目标蛋白质的组合物、转化体、试剂盒及利用其的目标蛋白质的生产方法。

技术领域

本发明涉及一种包含启动子及对伴娘蛋白和RNA结合域的融合蛋白进行编码的基因的表达盒、包含所述表达盒的表达载体、含有所述表达盒或所述表达载体的用于增容目标蛋白质的组合物、转化体、试剂盒以及利用该试剂盒的目标蛋白质的生产方法。

背景技术

在从异种细胞中生产重组蛋白的情况下存在重组蛋白形成不溶性凝聚体的问题，因此需要用于增加重组蛋白的可溶性的方法(Current opinion in biotechnology,2001,12,202-207)。但是，尚未开发能够应用到多种重组蛋白的重组蛋白增溶方法。

在这种背景下，本发明人为了开发用于增加目标蛋白质的可溶性的方法而进行了不懈努力，其结果确认结合有伴娘蛋白的mRNA(信使核糖核酸)支架(chaperone-recruiting mRNA scaffold，CRAS)系统及伴娘蛋白-基质相同位置表达(chaperone-substrate co-localized expression,CLEX)系统增加各种目标蛋白质的可溶性，并且完成了本发明。

发明内容

技术问题

本发明的目的在于提供一种用于增溶目标蛋白质的组合物，含有包含启动子及对伴娘蛋白和RNA结合域的融合蛋白进行编码的基因的表达盒，或者含有包含所述表达盒的表达载体。

本发明的另一目的在于提供一种转化体，含有包含启动子及对伴娘蛋白和RNA结合域的融合蛋白进行编码的基因的表达盒，或者含有包含所述表达盒的表达载体。

本发明的又一目的在于提供一种包含所述组合物或所述转化体的用于生产目标蛋白质的试剂盒。

本发明的又一目的在于提供一种包含启动子及对伴娘蛋白和RNA结合域的融合蛋白进行编码的基因的表达盒，或者包含所述表达盒的表达载体。

本发明的又一目的在于提供一种包含启动子、对目标蛋白质进行编码的基因、以及在该基因的3'末端处具有发夹(haripin)结构的基因的表达盒，或者包含所述表达盒的表达载体。

本发明的又一目的在于提供一种目标蛋白质的生产方法，包括以下步骤：

(i)将(a)包含启动子及对伴娘蛋白和RNA结合域的融合蛋白进行编码的基因的表达盒或者包含所述表达盒的表达载体、以及(b)包含启动子、对目标蛋白质进行编码的基因及在该基因的3'末端处具有发夹(haripin)结构的基因的表达盒或者包含所述表达盒的表达载体导入到微生物中；以及

(ii)培养所述微生物。

本发明的又一目的在于提供一种包含(a)对伴娘蛋白进行编码的顺反子及(b)对目标蛋白质进行编码的顺反子的表达盒，或者包含所述表达盒的表达载体。

本发明的又一目的在于提供一种用于增溶目标蛋白质的组合物，含有包含(a)对伴娘蛋白进行编码的顺反子及(b)对目标蛋白质进行编码的顺反子的表达盒，或者含有包含所述表达盒的表达载体。

本发明的又一目的在于提供一种转化体，含有包含(a)对伴娘蛋白进行编码的顺反子及(b)对目标蛋白质进行编码的顺反子的表达盒，或者含有包含所述表达盒的表达载体。

本发明的又一目的在于提供一种用于生产目标蛋白质的试剂盒，含有包含(a)对伴娘蛋白进行编码的顺反子及(b)对目标蛋白质进行编码的顺反子的表达盒、包含所述表达盒的表达载体、包含所述表达盒或所述表达载体的用于增溶目标蛋白质的组合物、或者包含所述表达盒或所述表达载体的转化体。