[发明专利]一种人胎盘间充质干细胞悬液保护剂

说明书

本发明公开了一种人胎盘间充质干细胞悬液保护剂，包含如下成分：人血白蛋白、海藻糖、维生素C、右旋糖酐氯化钠注射液和注射用NaCl溶液，经过基础液的制备、成分的添加和存储步骤，完成人胎盘间充质干细胞悬液保护剂的制备；本发明能够有效的维持胎盘间充质干细胞的活性、干性和均一性，且本发明成分明确，不含异源动物血清，安全性高，并且本发明提供的保存方法能够有效维持干细胞活性，高效省时，利于规模化生产，实验表明人胎盘间充质干细胞在上述细胞保存剂中，在4‑8℃保存48 h后，细胞形态均一，存活率仍保持在90%以上，间充质干细胞特异性表面标志CD73,CD105,CD90表达率高于95%。

技术领域

本发明涉及一种干细胞悬液保护溶液，具体涉及一种人胎盘间充质干细胞悬液保护剂。

背景技术

间充质干细胞(MSC)是一类具有自我更新能力且在适合微环境下具有多系分化潜能的原始细胞。它首先在骨髓中发现，随后分别在脂肪、骨骼、肌肉、肺、肝、胰腺以及在脐带、脐带血、胎盘组织中分离出来。由于其具有强大的增殖能力，较强的分化能力，低免疫原性和免疫调节功能，其在临床上的应用价值越来越受人们关注。

绒毛膜来源于孕妇产后的胎盘组织，是胎盘的主要构成部位。绒毛膜层组织中富含大量的间充质干细胞和血管内皮细胞。研究发现，人胎盘绒毛膜源的间充质干细胞除表达CD105、CD73、CD90等间充质干细胞表面标记外，其还表达某些胚胎干细胞的表面标记，如SSEA-4、TRA-1-61、TRA-1-80等，且不表达HLA-DR（MHC-II类分子），表明胎盘绒毛源的MSC更原始，免疫原性更低，这为临床上各种疾病的细胞替代治疗提供了新的选择。

如何长时间有效维持干细胞的活性成为临床细胞治疗的一大难点。生理盐水或葡萄糖注射液作为细胞的输注介质，由于其缺乏营养和缓冲能力，细胞活性的下降速度非常快，而且细胞易聚团，静脉输注存在安全隐患。血浆可以较好的维持细胞活性，但是，血浆中含有大量未知成分，异体输注存在安全隐患，同体输注则成本极高。因此发明一种成分明确，临床输注安全，有效长时间维持输注干细胞的活性和干性的保护剂就成为了临床治疗亟需解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，现提供一种能够有效维持胎盘间充质干细胞的活性、干性和均一性，且保护剂成分明确，不

含异源动物血清、安全性能高的人胎盘间充质干细胞悬液保护剂。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：一种人胎盘间充质干细胞悬液保护剂，其创新点在于：包含如下成分：人血白蛋白、海藻糖、维生素C、右旋糖酐氯化钠注射液和注射用NaCl溶液，经过基础液的制备、成分的添加和存储步骤，完成人胎盘间充质干细胞悬液保护剂的制备；具体步骤如下：

（1）基础液的制备：将右旋糖酐氯化钠注射液与注射用NaCl溶液按照1:1进行稀释混匀，完成基础液的制备；

（2）成分的添加：向上述基础液中依次加入人血白蛋白、海藻糖和维生素C，所述人血白蛋白的添加量为2-10%，所述海藻糖的添加量为0.001-0.005%，所述维生素C的添加量为0.01-0.05%，充分搅拌，混匀，制备得到人胎盘间充质干细胞悬液保护剂；

（3）存储：将制备得到的人胎盘间充质干细胞悬液保护剂放置于500ml无菌培养基瓶中，放于4℃环境下进行保存。

进一步的，所述步骤（1）中的右旋糖酐氯化钠注射液的浓度为6%，所述注射用NaCl溶液的浓度为0.9%。

进一步的，所述步骤（2）中的震荡时间为30 s-1 min，震荡速度为1820 rpm。