[发明专利]一种检测体液中淀粉样变成分的方法

说明书

本发明公开了一种检测体液中淀粉样变成分的方法，将体液10‑200ul，加入等体积的浓度为1‑50mmol/LNaOH溶液中，4℃反应5‑20分钟，然后利用200‑500ml聚乙二醇2000透析2小时；按体积比1:1‑10，将得到混合溶液与浓度2mol/L‑16mol/L的硫磺素T溶液混合，反应时间为5‑50分钟，然后注入硅胶制成的细管内，两端加电压400V‑800V，时间4‑20分钟，监测溶液中的荧光强度，根据每毫克淀粉样变蛋白产生荧光强度为参考，推算淀粉样变成分含量。所述体液为血液、脑脊液或浆膜腔积液。本发明改进检测体液淀粉样变成分检测工艺，通过高电压产生的静电技术，消除非淀粉样变成分对检测结果的干扰，消除非特异性荧光，提高检测淀粉样变成分的特异性，至少提高20％以上，降低干扰因素50％以上。

技术领域

本发明涉及检测体液参数的方法，具体说，是一种检测体液中淀粉样变成分的方法。

背景技术

淀粉样变综合征病因为淀粉样变蛋白成分沉积于器官组织细胞间质，毒害其相邻细胞，导致器官其功能丧失。由淀粉样变沉积引起的疾病有多种类型，其中阿尔茨海默症是由于淀粉样变成分沉积于脑组织，而引起中枢神经系统损害的疾病，其淀粉样变前蛋白为Aβ。以往研究认为淀粉样变均沉积于相应组织细胞间质，由于有分离技术水平限制，一直未能够从血液中检测到淀粉样变成分。已有技术改进检测技术，利用组织病理结合刚果红染色的方法发现了血液中存在淀粉样变，利用检测红细胞变形技术，间接推测淀粉样变患者的严重程度，其后利用荧光光度-直接法检测血液中淀粉样变成分水平。但是，组织病理结合刚果红染色，只能够特异性鉴定淀粉样变成，分属于定性方法，无法精确测定淀粉样变成分含量。通过检测红细胞变形程度，观察淀粉样变患者疾病程度，并非直接检测淀粉样变水平的方法。利用荧光度直接测定血液淀粉样变成分方法，虽然能够进行测定血液淀粉样变水平，但是不能够消除其他成分对测定结果干扰，特异性不高。用硫磺素T溶液直接测定血液淀粉样变成分的方法，测定的结果中包括淀粉样变成分以及血液中的干扰成分，这样结果出现非特异性增高或干扰染料与淀粉样变结合反应，降低检测结果，使结果有时被增高或被降低。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种检测体液中淀粉样变成分的方法，显著提高检测淀粉样变成分的准确性。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种检测体液中淀粉样变成分的方法，包括以下步骤：

(1)将体液10-200ul，加入等体积的浓度为1-50mmol/LNaOH溶液中，4℃反应5-20分钟，然后利用200-500ml聚乙二醇2000透析2小时；

(2)按体积比1:1-10，将步骤(1)得到混合溶液与浓度2mol/L-16mol/L的硫磺素T溶液混合，反应时间为5-50分钟，然后注入硅胶制成的细管内，两端加电压400V-800V，时间4-20分钟，监测溶液中的荧光强度，根据每毫克淀粉样变蛋白产生荧光强度为参考，推算淀粉样变成分含量。

所述体液为血液、脑脊液或浆膜腔积液。

本发明的有益效果是：改进检测体液淀粉样变成分检测工艺，通过高电压产生的静电技术，消除非淀粉样变成分对检测结果的干扰，消除非特异性荧光，提高检测淀粉样变成分的特异性，至少提高20％以上，降低干扰因素50％以上。

附图说明

图1是本发明的检测体液中淀粉样变成分的方法的流程图。

图2是两种淀粉样变检测方法的对比图。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细说明：

如图1所示，本发明的检测体液中淀粉样变成分的方法，包括以下步骤：