[发明专利]双发射比率型荧光传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种双发射比率型荧光传感器在检测乙酰胆碱酯酶中的应用，所述双发射比率型荧光传感器采用谷胱甘肽修饰纳米金颗粒制备得到，其有两个荧光发射峰，分别在600nm处和800nm处；其中600nm处发射峰较弱，800nm处发射峰较强；

乙酰胆碱酯酶在一定条件下可以将硫代乙酰胆碱水解，形成硫代胆碱和乙酸，硫代胆碱与所述双发射比率型荧光传感器相互作用，最终引起金纳米颗粒荧光发射中心的变化，使得600nm处荧光发射增强，而800nm处荧光发射同步减弱，根据800nm处的荧光强度与600nm处的荧光强度比值测定乙酰胆碱酯酶的含量。

2.一种双发射比率型荧光传感器检测乙酰胆碱酯酶的方法，其特征在于，包括如下步骤：

将乙酰胆碱酯酶、底物硫代乙酰胆碱和双发射比率型荧光传感器按比例混合，制成反应体系，并在37℃下孵育25min；所述双发射比率型荧光传感器采用谷胱甘肽修饰纳米金颗粒制备得到，其有两个荧光发射峰，分别在600nm处和800nm处；其中600nm处发射峰较弱，800nm处发射峰较强；

乙酰胆碱酯酶在一定条件下可以将硫代乙酰胆碱水解，形成硫代胆碱和乙酸，硫代胆碱与所述双发射比率型荧光传感器相互作用，最终引起金纳米颗粒荧光发射中心的变化，使得600nm处荧光发射增强，而800nm处荧光发射同步减弱，根据800nm处的荧光强度与600nm处的荧光强度比值测定乙酰胆碱酯酶的含量。

3.根据权利要求2所述的双发射比率型荧光传感器检测乙酰胆碱酯酶的方法，其特征在于，反应体系制备方法包括：

加入10μL浓度为1mM的底物硫代乙酰胆碱、3μL的双发射比率型荧光传感器、待测乙酰胆碱酯酶和适量的超纯水，制成100μL反应体系。

4.一种双发射比率型荧光传感器在检测农药残留中的应用，所述双发射比率型荧光传感器采用谷胱甘肽修饰纳米金颗粒制备得到，其有两个荧光发射峰，分别在600nm处和800nm处；其中600nm处发射峰较弱，800nm处发射峰较强；

乙酰胆碱酯酶在一定条件下可以将硫代乙酰胆碱水解，形成硫代胆碱和乙酸，硫代胆碱与所述双发射比率型荧光传感器相互作用，最终引起金纳米颗粒荧光发射中心的变化，使得600nm处荧光发射增强，而800nm处荧光发射同步减弱；农药为乙酰胆碱酯酶抑制剂，体系中加入了农药成分，使得在600nm处荧光发射增强程度减弱，且800nm处荧光发射减弱程度减小，根据800nm处的荧光强度与600nm处的荧光强度比值测定乙酰胆碱酯酶抑制剂的含量。

5.一种双发射比率型荧光传感器检测农药残留的方法，其特征在于，包括如下步骤：

将乙酰胆碱酯酶与待测农药混合，在37℃下孵育20min；

按比例加入底物硫代乙酰胆碱和双发射比率型荧光传感器，制成反应体系，在37℃下孵育5min；所述双发射比率型荧光传感器采用谷胱甘肽修饰纳米金颗粒制备得到，其有两个荧光发射峰，分别在600nm处和800nm处；其中600nm处发射峰较弱，800nm处发射峰较强；

乙酰胆碱酯酶在一定条件下可以将硫代乙酰胆碱水解，形成硫代胆碱和乙酸，硫代胆碱与所述双发射比率型荧光传感器相互作用，最终引起金纳米颗粒荧光发射中心的变化，使得600nm处荧光发射增强，而800nm处荧光发射同步减弱；农药为乙酰胆碱酯酶抑制剂，体系中加入了农药成分，使得在600nm处荧光发射增强程度减弱，且800nm处荧光发射减弱程度减小，根据800nm处的荧光强度与600nm处的荧光强度比值测定乙酰胆碱酯酶抑制剂的含量。

6.根据权利要求5所述的双发射比率型荧光传感器检测农药残留的方法，其特征在于，反应体系制备方法包括：

加入8μL浓度为1U/mL乙酰胆碱酯酶、10μL浓度为1mM硫代乙酰胆碱、3μL的双发射比率型荧光传感器、待测农药以及适量的超纯水，制成100μL反应体系。