[发明专利]一种胍盐离子液体双水相萃取柠檬皮渣中柠檬苦素的方法

权利要求书

1.一种胍盐离子液体双水相萃取柠檬皮渣中柠檬苦素的方法，其特征在于,是将柠檬皮渣作为原料，按下列步骤进行提取：

1）原料粉碎后进行酶解，在粉碎后的柠檬皮渣粉末中加入浓度小于10%的乙醇溶液，调节液料体积质量比为20:1~25:1；随后添加复合酶对皮渣进行酶解，酶解完成后过滤得到酶解液；

复合酶由纯度99%以上的固体溶菌酶、固体纤维素酶、固体6-磷酸葡萄糖酸内酯酶、固体木瓜蛋白酶、固体柠檬酸裂解酶和固体二磷酸酮糖裂合酶组成，其质量比例为0.5：1.5：3：4：0.5：0.5，用质量为200倍的无菌蒸馏水溶解制得；复合酶添加量为柠檬皮渣粉末溶解于乙醇溶液后总质量的1.2%~1.5%，酶解温度为35℃~40℃，pH值5.5~6.0，酶解时间2h~2.5h；

2）取步骤1）中的酶解液进行脱盐；

3）将步骤2）中制得的酶解液进行胍盐离子液体双水相萃取，取上层液体离子相；所述进行胍盐离子液体双水相萃取是通过在酶解液中加入胍盐离子液体和无机盐，形成胍盐离子液体双水相萃取体系，随后加入KBr，调节pH值，超声振荡以加速溶质溶解，脱气，随后，在10~12℃下静置10~12h，取上层液体离子相；

其中胍盐离子液体双水相萃取体系的构成和使用：

A.胍盐离子液体双水相体系由胍盐离子液体和无机盐构成，其中2.23~2.37mol/L的[BMG][BF₄]离子溶液配合1.8~2.0mol/L的KH₂PO₄溶液构成[BMG][BF₄]/KH₂PO₄离子液体双水相体系；1.7~2.1mol/L的[PHMG][PF₆]配合0.9~1.0mol/L的K₃PO₄构成[PHMG][PF₆]/KH₂PO₄离子液体双水相体系； 0.7~1.0mol/L的[TMG][Cl]配合1.2~1.5mol/L的NaH₂PO₄构成[TMG][Cl]/NaH₂PO₄离子液体双水相体系；胍盐离子液体双水相体系为以上三种离子液体双水相体系中的任意一种；

B.改变电动势所用试剂为KBr；

C.[BMG][BF₄]/KH₂PO₄离子液体双水相体系超声条件为：超声频率为30kHz、功率180W、温度40℃、时间1~1.5h；脱气条件为：操作压强0.04~0.06MPa、脱气时间5~10min；用0.5mol/L磷酸调节pH值至3.7~4.0；

D.[PHMG][PF₆]/KH₂PO₄离子液体双水相体系超声条件为：超声频率为70kHz、功率310W、温度45℃、时间3~3.5h；脱气条件为：操作压强0.01~0.03MPa、脱气时间20~25min；用0.1mol/L磷酸调节pH值至5.1~5.4；

E.[TMG][Cl]/NaH₂PO₄离子液体双水相体系超声条件为：超声频率50kHz、功率260W、温度35℃、时间0.5~1h；脱气条件为：操作压强0.02~0.03MPa、脱气时间10~20min；用0.5mol/L磷酸调节pH值至2.8~3.1；

4）将步骤3）中的上层液体离子相用复合有机溶剂进行萃取，分离出上层有机相；

5）将步骤4）中分离出的上层有机相通过减压蒸馏、冷冻干燥和纯化，制得柠檬苦素粉。

2.如权利要求1所述的一种胍盐离子液体双水相萃取柠檬皮渣中柠檬苦素的方法，其特征在于，在步骤1）中将皮渣粉碎前还需要烘干，调节水分含量至占总重量的20%以下，粉碎后经100~120目筛网去除掉未通过筛网的皮渣。

3.如权利要求1所述的一种胍盐离子液体双水相萃取柠檬皮渣中柠檬苦素的方法，其特征在于，在步骤2）中脱盐是通过将酶解液转移到8000~14000截留分子量的透析袋中，于体积2000倍以上的无菌蒸馏水中静置24h以脱去微量无机盐。