[发明专利]红细胞的凝集方法和分离方法以及红细胞凝集用试剂

说明书

本发明提供可从血液试样使红细胞瞬间地以充分的尺寸凝集，可从血液试样完全地分离红细胞的、红细胞的凝集方法和分离方法以及红细胞凝集用试剂。本发明的红细胞的凝集方法包括在血液试样中添加含有胆酸系表面活性剂和酸的溶液。另外，本发明的红细胞的分离方法包括分离通过上述本发明的方法凝集的红细胞。此外，本发明的红细胞凝集用试剂含有胆酸系表面活性剂和酸。

技术领域

本发明涉及红细胞的凝集方法和分离方法以及红细胞凝集用试剂。

背景技术

血液被用于各种疾病的诊断或治疗的判定，由红细胞、白细胞和血小板等血细胞成分及作为液体成分的血浆构成。该血液中含有的血浆(液体成分)或从血液除去血细胞成分和纤维蛋白得到的血清含有蛋白质、糖类、脂质等维持生物体功能所需要的各种成分，可用作用于进行内脏系统疾病等的诊断或治疗的生物化学检查用的分析用试样。

但是，若在进行生物化学检查时血细胞成分存在于分析用试样中，则有血细胞成分妨碍检查的情况，特别是在利用比色分析等来进行生物化学检查的情况下，有红细胞对试样的颜色或浊度造成影响而妨碍检查的情况。

因此，在生物化学检查中，将预先从全血试样分离红细胞等血细胞成分得到的血浆或血清用作分析用试样。作为将血细胞成分与血浆或血清分离的方法，采用以下方法：将使用采血针从患者采血得到的血液放入采血管中，将含有血液的采血管置于离心分离机中进行离心分离。但是，使用上述离心分离机的分离有需要长时间，操作繁杂等问题，需要更简便的分离方法。

另外，作为离心分离以外的分离方法，有使用血细胞分离膜、血细胞分离材料、称作中空丝的特殊过滤器的方法。例如，报道了使用由固相层支持体粒子、固相层支持体粘合剂膜、红细胞凝集素构成的过滤器，从全血样品分离红细胞，生成血浆的方法(专利文献1)。

但是，在使用这些过滤器的情况下，滴加的血液试样在过滤器内浸透并扩散，导致血浆或血清残留在过滤器中。因此，在血液试样为少量的情况下，分离红细胞后的血浆或血清的量变少，有无法得到充分进行生物化学检查的量的分析用试样的问题。此外，由于在分离操作的过程中对过滤器施加一定的压力，所以有产生溶血，或血液飞散等问题。

作为从全血除去红细胞的其它方法，报道了在可有效地使红细胞凝集的条件下，使含有选自乙酸、枸橼酸、抗坏血酸、乳酸、马来酸、苹果酸和丙二酸的酸的溶液与全血试样接触，接着使用纤维状材料过滤的方法(专利文献2)。

另一方面，报道了作为表面活性剂的一种的胆酸系表面活性剂为用于膜蛋白质的提取或分离的阴离子型表面活性剂，例如在使用具备生物传感器的装置来测定血红蛋白浓度时，将胆酸系表面活性剂用作为溶血剂(专利文献3)。但是，到目前为止未报道过在使红细胞凝集时使用胆酸系表面活性剂的实例。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：美国专利第5981294号

专利文献2：美国专利第5118428号

专利文献3：日本特开2014-102143。

发明内容

发明所要解决的课题

如上所述，在目前的利用离心分离法或特殊的过滤器的红细胞的分离法中，操作需要长时间且复杂，或有溶血或血液飞散的问题。另外，即使在使用酸来使红细胞凝集的方法(专利文献2)的情况下，由于所凝集的红细胞的尺寸小，所以红细胞的分离不完全，作为用于生物化学检查的分析用试剂而言不充分。

本发明鉴于上述情况而完成的，其目的在于，提供可从血液试样使红细胞瞬间地以充分的尺寸凝集，可从血液试样完全地分离红细胞的、红细胞的凝集方法和分离方法以及红细胞凝集用试剂。

用于解决课题的手段