[发明专利]确定与心血管疾病相关的风险的方法

说明书

本发明涉及一种用于确定心血管疾病风险的新方法，包含检测样本中的MMP‑8和CRP，并将检测的量与MMP‑8和CRP的相应预定值进行比较，其中检测MMP‑8和CRP水平升高指示心血管事件或疾病的存在或风险。本发明还涉及检测MMP‑8和CRP用于预测发生心血管事件的风险、监测治疗对心血管事件或心血管疾病的影响，或用于检测亚临床心血管疾病的存在的用途。此外，提出了一种用于构建CVD疾病存在或CVD事件风险的风险预测模型的方法。

技术领域

本发明描述了用于改善心血管疾病的预测和估计预后的方法。本方法基于生物标志物的鉴定和随后组合，该生物标志物特别适合于区分具有心血管疾病事件风险的受试者和健康受试者。本文鉴定的生物标志物还可用于检测亚临床心血管疾病以及监测治疗或药物对心血管疾病的影响。本发明包含基质金属蛋白酶-8(MMP-8)和C反应蛋白(CRP)的用途，其用于心血管疾病事件的预测和估计预后，以及用于监测治疗和药物对心血管疾病事件的影响。此外，MMP-8和CRP浓度测量值可用于检测亚临床心血管疾病。

背景技术

心血管疾病(CVD)是一类涉及心脏或血管的疾病。心血管疾病是全球死亡的主要原因。心血管疾病包含以下疾病，如冠状动脉疾病(CAD)(诸如心绞痛和急性心肌梗塞(AMI))、中风、高血压性心脏病、风湿性心脏病、心肌病、心房颤动、先天性心脏病、心内膜炎、主动脉瘤和外周动脉疾病。

几种不同的病理生理机制在CVD发病机制、发展和过程中起重要作用。这些包括但不限于炎症、感染、促血栓形成和血栓形成活性、剪切应力和内皮反应性。CVD的主要原因是动脉粥样硬化，这是一种表征为受影响的血管壁中积聚脂质和炎症的疾病。在动脉粥样硬化过程和病理发展过程中，受影响的动脉壁由于积聚和形成脂肪病变或条纹而变厚，导致斑块(动脉粥样硬化)的积聚。平滑肌和具有细胞外脂滴的泡沫细胞核以及富含I型胶原蛋白的细胞外基质(ECM)形成(纤维)帽，随着时间的推移，特别是当受到增强的且连续和持续的炎症影响时，将使该帽易于破裂(Herman等人，2001)。因此，这些过程导致闭塞和血栓，闭塞和血栓通常导致不良心血管事件或结果。

I型胶原蛋白是动脉粥样硬化病变中主要的蛋白质细胞外基质(ECM)成分和纤维帽的承重分子。在胶原水解基质金属蛋白酶(MMP)中，MMP-8在催化上是最有效的并且能够引发I型胶原的降解(Sorsa等人，2006)。

在不稳定性心绞痛中发现了病理性升高的MMP-8mRNA和蛋白质表达、产生以及血清/血浆水平。此外，还发现了血清/血浆MMP-8与病程之间的关联，以及不良CVD结果的长期发展。已经证实升高的血清MMP-8水平与CVD发病率增加有关并且反映了其增加。在细胞培养研究中，MMP-8通过其使保护性纤维帽变薄的能力与动脉粥样硬化斑块不稳定有关，从而使其更容易破裂(Herman等人，2001)。在人动脉粥样硬化斑块样本中，MMP-8蛋白和mRNA与巨噬细胞共定位(Molloy等人，2004)。此外，腹主动脉瘤含有显著高于正常主动脉组织的MMP-8浓度(Wilson等人，2005)。在患有斑块进展的无症状患者中观察到斑块MMP-8活性增加(Turu等人，2005)。与具有更稳定形态的病变相比，易于破裂的斑块表达更多的免疫反应性MMP-8(Herman等人，2001)。

然而，迄今为止，只有少数研究调查了血清MMP-8浓度与CVD的关系。两项病例对照研究结果显示，心力衰竭和脑缺血患者的血清MMP-8浓度降低(Wilson等人，2005；Lorenzl等人，2003)。在最近的两项大型研究中，血浆MMP-8浓度与CAD的存在和严重程度(Kato等人，2005)和颈动脉斑块进展(Turu等人，2005)呈正相关。Tuomainen等人的结果(2007年和2014年)显示血清MMP-8浓度在普遍或亚临床动脉粥样硬化中升高并且与致死结果相关。最近发现血浆MMP-8是代谢综合征的重要预测因子，即使在调整促炎细胞因子hs-CRP和TNF-α后，这种关系仍然存在(Hoseini等人，2015)。

升高的系统性MMP-8也在其他疾病中发挥重要作用。已充分记录MMP-8在ECM处理和炎症及免疫应答修饰中的主要作用以及作为药物靶标。