[发明专利]携带双特异性T细胞衔接器（BiTE）的腺病毒

权利要求书

1.一种包括式(I)的序列的腺病毒：

5'ITR-B₁-B_A-B₂-B_X-B_B-B_Y-B₃-3'ITR(I)

其中：

B₁是键或包括：E1A、E1B或E1A-E1B；

B_A包括-E2B-L1-L2-L3-E2A-L4；

B₂是键或包括：E3；

B_X是键或包括以下的DNA序列：限制性位点、一个或多个转基因或两者；

B_B包括L5；

B_Y是键或包括以下的DNA序列：限制性位点、一个或多个转基因或两者；

B₃是键或包括：E4；

其中所述腺病毒编码第一双特异性T细胞衔接器(BiTE)和第二BiTE，所述第一BiTE包括至少两个结合结构域Bd1和Bd2，其中所述结构域中的至少一个如Bd1对如T细胞等免疫细胞上的表面抗原具有特异性，并且所述第二BiTE包括至少两个结合结构域Bd3和Bd4，并且所述结合结构域中的至少一个如Bd3对如T细胞等免疫细胞上的表面抗原具有特异性；并且

其中所述腺病毒是EnAd或Ad11。

2.根据权利要求1所述的腺病毒，其中所述腺病毒是EnAd。

3.根据权利要求1或2所述的腺病毒，其中所述表面抗原是T细胞受体复合物(TCR)的组分，所述组分如选自CD3、TCR-α和TCR-β。

4.根据权利要求3所述的腺病毒，其中所述表面抗原是CD3，如CD3ε、CD3γ和CD3δ，具体的说CD3ε。

5.根据权利要求1或2所述的腺病毒，其中所述BiTE中的所述结合结构域之一对如CD31、CD2和CD277等非TCR活化蛋白具有特异性。

6.根据权利要求1到5中任一项所述的腺病毒，其中所述第一BiTE中的结合结构域(如Bd1)和所述第二BiTE中的结合结构域(如Bd3)对如T细胞等所述免疫细胞上的同一表面抗原具有特异性。

7.根据权利要求1到5中任一项所述的腺病毒，其中所述第一BiTE中的结合结构域(如Bd1)和所述第二BiTE中的结合结构域(如Bd2)对例如相同或不同免疫细胞上的不同表面抗原具有特异性。

8.根据权利要求1到7中任一项所述的腺病毒，其中所述第一BiTE中的Bd2和所述第二BiTE中的Bd4结合感兴趣的同一抗原。

9.根据权利要求1到7中任一项所述的腺病毒，其中所述第一BiTE中的所述Bd2和所述第二BiTE中的Bd4结合感兴趣的不同抗原。

10.根据权利要求1到9中任一项所述的腺病毒，其中所述结合结构域之一对肿瘤抗原具有特异性，所述肿瘤抗原如CEA；MUC-1；EpCAM；HER受体HER1、HER2、HER3、HER4；PEM；A33；G250；碳水化合物抗原Le^y、Le^x、Le^b；PSMA；TAG-72；STEAP1；CD166；CD24；CD44；E-钙粘蛋白；SPARC；ErbB2和ErbB3。

11.根据权利要求10所述的腺病毒，其中所述结合结构域之一，例如Bd2和/或Bd4对EpCAM具有特异性。