[发明专利]自动体液分析

说明书

公开了用于体液样品的自动细胞分析的方法、装置和系统。该方法、装置和系统将分水岭变换应用于通过使体液样品流过流式细胞仪而产生的数据，以确定将用于分析该数据的阈值。

相关申请的交叉引用

本申请要求2016年9月8日提交的美国临时专利申请No.62/385,055的权益，该申请通过引用整体并入本文。

背景技术

体液分析提供了关于体液组成的重要信息，包括细胞类型、不同类型细胞的计数、异常细胞的存在、感染性颗粒(例如朊病毒、病毒、细菌等)的存在。这些信息对于提供临床诊断和预后至关重要。

多种方法用于分析各种生物流体样品中的细胞。用于细胞分析的方法包括通过光学或荧光显微镜进行视觉和/或自动检查。通常实施细胞检查和这些类型的分析以获得关于样品中细胞谱系、成熟阶段和/或细胞计数的信息。

通过显微镜分析生物样品中的细胞可能是昂贵且耗时的。流式细胞术提供了用于鉴定和区分不同细胞类型和计算生物流体样品中的不同细胞类型的替代方法。在流式细胞仪中，细胞一次通过一个或几乎一次通过一个地通过感应区域，其中每个细胞被能量源照射。通常，单波长光源(例如，激光器等)用作能量源，并且各种检测器中的一个或多个基于细胞与施加的能量的相互作用来记录数据。流式细胞术通常用于血液学，并且已成功用于血液疾病(包括血癌)的诊断。

流式细胞术中的挑战包括捕获粒子事件(events)(例如，细胞事件)，同时去除类似于小细胞事件的不期望的信号(例如，噪声)。对流式细胞术数据的质量产生不利影响的其他因素包括从样品到样品的有核细胞计数的变化，例如，这导致荧光信号的变化，使得与细胞事件相关的信号在不同类型的样品中变化很大。

发明内容

公开了用于体液样品的自动细胞分析的方法、装置和系统。该方法、装置和系统将分水岭变换(watershed transform)应用于通过使体液样品流过流式细胞仪产生的数据，以确定将用于分析该数据的阈值。

在某些实施方案中，公开了一种用于分析含有细胞的体液的方法。该方法可以包括收集由被能量源照射的体液样品发射的信号，其中体液样品用染色荧光染料，其中荧光染料渗透细胞膜并与核酸结合形成细胞内的染料复合物；对所收集的信号应用分水岭变换，从而在所收集的信号中定义多个峰和谷；迭代地将分水岭变换应用于多个峰和谷，直到获得主谷(dominant valley)；根据主谷的信号设置用于信号分析的阈值；并且分析高于该阈值的信号以区分体液中不同类型的细胞。在某些实施方案中，体液样品是未溶解的，即体液中含有的细胞是未溶解的。

在某些实施例中，该方法可以包括迭代地将分水岭变换应用于多个峰和谷，直到获得主谷，该主谷位于通过将分水岭变换迭代地应用于多个峰而获得的两个主峰之间。

在某些实施例中，主谷可以将对应于第一组有核细胞事件的第一主峰(dominantpeak)与对应于第二组有核事件的第二主峰分开。

在某些实施例中，收集的信号可包括散射光。散射光可包括前向光散射或侧向光散射。侧向光散射可以包括偏振侧散射或消偏振侧散射。在某些实施方案中，收集的信号可包括荧光信号。

在某些实施例中，该方法可包括收集包括散射光的第一多个信号和包括荧光信号的第二多个信号；(a)对收集的第一多个信号应用分水岭变换，从而定义多个峰和谷；迭代地将分水岭变换应用于多个峰和谷，直到获得主谷；根据主谷的信号设定用于分析收集的散射光的阈值；并使用阈值来区分细胞事件和非细胞事件；(b)对所收集的第二多个信号应用分水岭变换，从而定义多个峰和谷；迭代地将分水岭变换应用于多个峰和谷，直到获得主谷；根据主谷的信号设定用于分析收集的荧光信号的阈值；并使用阈值来区分有核细胞事件和非有核细胞事件。

在某些实施方案中，该方法可包括将有核细胞事件分类为单核细胞事件和非白细胞事件。

在某些实施方案中，步骤(b)可以对应于步骤(a)中鉴定的细胞事件的荧光信号进行。