[发明专利]内部封定脂囊泡

说明书

一种生成内部封定脂囊泡的方法，包含：提供前驱脂囊泡，其具备包覆于脂质膜内的水性内壁，其中前驱脂囊泡的脂质膜对交联剂不具通透性；使脂质膜短暂地具备通透性，以生成具通透性的囊泡；使具通透性的囊泡与不具活性但可活化的交联剂接触，不具活性但可活化的交联剂藉此进入具通透性的囊泡中；使具通透性的囊泡回复成不具通透性的囊泡；清除任何囊泡外的交联剂；及活化不具活性但可活化的交联剂，使不具通透性的囊泡中产生交联反应，以生成内部封定的脂囊泡。

相关申请的交叉引用

本申请案主张于2016年8月1日申请的美国临时申请案第62/369,440号的优先权，该临时申请案的全部内容以引用方式并入本文中。

背景技术

细胞膜由双层脂质(lipid bilayer)、蛋白质及聚糖组成，以上物质共同构成一细致界面，负责掌控细胞标志及物质运输、信号传导、细胞黏附等功能。双层脂质具备高度流动性，可使细胞膜内各种基团侧向流动。此细致界面为许多生物学研究及生医领域技术应用的核心，而目前亦出现许多于一稳固基质上重构此细致界面的实务应用技术。细胞本质上较为脆弱，易受各种影响表面生化反应的生物机制(如细胞凋亡及囊泡出芽)左右。

目前维持细胞膜构造的技术包括于平面或球状基质上重构纯化细胞膜，以及使用甲醛(formaldehyde)与戊二醛(glutarasldehyde)等化学交联剂将细胞完整封定。然而，就重构复杂且具流动性的细胞膜界面而言，这些技术仍有不足之处，例如在合成基质上重构纯化细胞膜时，会面临细胞膜杂质、细胞膜破损、细胞膜覆盖基质不完全等问题，而使用化学封定技术时，则会造成膜蛋白原始状态改变、蛋白流动性降低，并在生医技术应用过程中制造毒性。有鉴于生成稳定且具流动性的细胞膜界面存在诸多困难，许多以膜界面上分子间交互作用为核心的生物学研究及生医技术应用因此进展有限。

发明内容

根据本申请案所请发明的一态样，提供一种生成内部封定脂囊泡的方法。该方法包括提供前驱脂囊泡，其具备包覆于脂质膜内的水性内壁，其中前驱脂囊泡的脂质膜对交联剂不具通透性；使脂质膜短暂地具备通透性，以生成具通透性的囊泡；使具通透性的囊泡与不具活性但可活化的交联剂接触，不具活性但可活化的交联剂藉此进入具通透性的囊泡中；使具通透性的囊泡回复成不具通透性的囊泡；清除任何囊泡外交联剂；及活化不具活性但可活化的交联剂，使不具通透性的囊泡中产生交联反应，以生成内部封定的脂囊泡。

在某些实施例中，前驱脂囊泡为细胞或病毒。例如细胞可为哺乳动物细胞或非哺乳动物细胞，如人类细胞、非人类细胞、细菌细胞、真菌细胞、不朽化细胞、基因改造细胞、人造细胞、免疫细胞、上皮细胞、肝细胞、脂肪细胞、肾细胞、纤维母细胞、软骨细胞、肌肉细胞、血球细胞、骨细胞、分泌细胞、干细胞、耳毛细胞、脑细胞、神经细胞、肺细胞或癌细胞。