[发明专利]心肌肌钙蛋白的测定方法及测定试剂

说明书

本发明公开一种心肌肌钙蛋白的测定方法及测定试剂，其不论试样种类或有无其它成分均可更准确地测定试样中所含的心肌肌钙蛋白量。心肌肌钙蛋白的测定方法包含前处理工序，所述前处理工序将从生物体中分离出的试样和含有表面活性剂及酸性化剂中的任一种或两者的前处理液进行混合，通过免疫分析测定从生物体中分离出的试样中的心肌肌钙蛋白。心肌肌钙蛋白的免疫分析用试剂具备含有表面活性剂及酸性化剂中的任一种或两者的前处理液。

技术领域

本发明涉及一种心肌肌钙蛋白的测定方法及测定试剂。

背景技术

心肌肌钙蛋白参与心肌收缩的调节，以由心肌肌钙蛋白I、肌钙蛋白C、心肌肌钙蛋白T的3种亚单元构成的复合体的形态存在。心肌肌钙蛋白I和心肌肌钙蛋白T均在心脏中特异性地表达，心肌细胞受伤害时，被释放到血中，因此，在心肌梗塞的诊断、心脏疾病的监测中作为血中标记物被利用。

作为与心肌肌钙蛋白的测定关联的技术，报道了以下技术。

专利文献1中记载有：通过利用含有给定的阴离子型表面活性剂(具有1个磺酸基的烷基)的基质，可以将标准液中的心肌肌钙蛋白稳定化。专利文献2中记载有：在心肌肌钙蛋白的免疫学测定中，可以利用2价的阳离子。

现有技术文献

专利文献

专利文献1:国际公开第2006/116005号

专利文献2:日本专利第5864530号

发明内容

发明所要解决的技术问题

血中的心肌肌钙蛋白作为心肌梗塞的诊断标记物被广泛利用，但在血中以由心肌肌钙蛋白I、肌钙蛋白C及心肌肌钙蛋白T构成的复合体形式存在，且与血中成分形成复合体。特别是心肌肌钙蛋白I容易由于其它成分等的状态而改变性状，如在肝素存在下与肝素显示相互作用，容易被血中蛋白酶分解等，在使用抗肌钙蛋白抗体的免疫测定中不显示稳定的值，因此，被看作不稳定的蛋白质。例如，将血清用作血液试样的情况的心肌肌钙蛋白I的测定值、及将血浆用作血液试样的情况的心肌肌钙蛋白I的测定值有时不一定显示相同的值。在医疗现场，含有各种抗凝固剂(例如肝素、EDTA、柠檬酸)的采血管被用于血浆的制备，但血浆中的心肌肌钙蛋白I的测定值有时根据用于血浆的制备的抗凝固剂的种类而显示不同的值。另外，在检测中使用不同抗体时，测定试剂间也可看到肌钙蛋白测定值的背离。因此，存在如下问题：在测定心肌肌钙蛋白I量的心肌梗塞的诊断中，在免疫测定法中难以规定心肌肌钙蛋白I的真值，因此，难以设定不受试样的种类或其它成分的影响的正常人的固定值。心肌肌钙蛋白T的测定仅使用单一的测定法，因此，如肌钙蛋白I那样的测定值背离的问题不严重，但如果报道了多种测定方法的情况下，有可能产生与心肌肌钙蛋白I同样的问题。

本发明的目的在于，提供一种心肌肌钙蛋白的测定方法及测定试剂，所述测定方法不论试样种类或有无其它成分均可更准确地测定试样中所含的心肌肌钙蛋白量。

用于解决问题的技术方案

本发明人等为了实现上述目的进行了深入研究，结果发现，在使用以免疫学方式测定生物体试样中的心肌肌钙蛋白I的方法时，通过在将所述生物体试样供于免疫反应之前设置前处理工序，不论生物体试样的种类或有无其它成分，均可得到再现性好的心肌肌钙蛋白测定值，从而完成了本发明，其中，所述前处理工序将含有表面活性剂及酸性化剂中的任一种或两者的前处理液进行混合。

本发明的构成如下所述。

(1)一种通过免疫分析测定从生物体中分离出的试样中的心肌肌钙蛋白的方法，其包含前处理工序，所述前处理工序将从生物体中分离出的试样和含有表面活性剂及酸性化剂中的任一种或两者的前处理液进行混合。

(2)根据(1)所述的方法，其中，所述前处理液还含有还原剂。