[发明专利]LAG-3结合元件

说明书

本发明涉及一种结合到淋巴细胞活化基因3(LAG‑3)的特异性结合元件。所述特异性结合元件优选地包括LAG‑3抗原结合位点，所述LAG‑3抗原结合位点可以位于所述特异性结合元件的CH3结构域的两个或更多个结构环中。本发明的特异性结合元件可以用于例如癌症治疗。

相关的申请

本案与2016年6月20日提交的US62/352470相关，其全部内容通过引用以其整体合并于此。

发明领域

本发明涉及结合淋巴细胞活化基因3(LAG-3)的特异性结合元件。所述特异性结合元件优选包括LAG-3抗原结合位点，所述LAG-3抗原结合位点可以位于所述特异性结合元件的CH3结构域的两个或更多个结构环中。本发明的特异性结合元件获得例如在癌症治疗中的应用。

发明背景

淋巴细胞活化基因-3(LAG-3；CD223)是Ig超家族的成员，与CD4在遗传上和结构上相关(虽然仅有20％的序列同一性)。如CD4一样，LAG-3结合主要组织相容性复合体II类(MHC II类，MHC class II)分子，但具有比CD4更高的亲和性(K_D＝60nM)。LAG-3在活化的T细胞、NK细胞、浆细胞样树突细胞(pDCs)、B细胞、γδT细胞上表达，参与免疫抑制，特别是通过在一定百分比的调节性T细胞(Treg)上持续强表达(Liang et al，2008)。

LAG-3基因位于人的12号染色体上，邻近CD4基因，横跨8个外显子。有五种可选的转录产物，其中，两种产生蛋白质产物：全长的跨膜蛋白，以及选择性剪接的可溶单体形式。全长转录产物编码分子量为70kDa的525个氨基酸的蛋白质，并具有功能活性，而可溶形式看起来不结合MHC II类分子，它的功能是未知的。人的全长LAG-3蛋白与食蟹猴(cynomolgus monkey,Macaca fascicularis)的LAG-3具有93％的序列同一性，与家鼠(house mouse,Mus musculus)LAG-3具有70％的序列同一性。

LAG-3为具有四个细胞外的Ig样结构域(D1-D4)的跨膜蛋白，以及负责LAG-3信号转导的细胞质部分。胞质结构域(cytoplasmic domain)具有与LAG-3相关蛋白(LAG-3-associated protein,LAP)相关的EP(谷氨酸/脯氨酸)基序，以及被认为是T细胞功能的LAG-3调节所需的KIEELE基序。关于EP基序的作用的报道表明，它可能负责LAG-3向T细胞表面膜的输送(Bae et al，2014)，或可能在T细胞活化期间直接负责调节信号转导转录因子5(Signal transducers and activators of transcription，STAT5)的下游信号转导(Durham et al，2014)，或可能两者皆有。

LAG-3对T细胞的免疫抑制机制被认为由活化的T细胞上LAG-3的交联驱动，在T细胞活化期间产生降低的钙通量(calcium flux)和IL-2释放(Huard et al，1997)。在抗原递呈细胞(Antigen Presenting Cell,APCs)上，LAG-3正调节(positive regulation)T细胞结合MHC II类分子导致降低的IL-12分泌和CD86的下调(Liang et al，2008)，由不适当的激活导致T细胞的失效的“二级信号”，和/或通过APCs降低的抗原呈递。。LAG-3敲除的小鼠模型是可行的，仅有轻度淋巴增生(lympho-hyperproliferation)(Workman et al，2003)，表明LAG-3充当湿度的免疫“刹车(brake)”。