[发明专利]有效和平衡的双向启动子

权利要求书

1.一种包含双向hCMV-rhCMV启动子的重组核酸分子，该双向hCMV-rhCMV启动子在一个方向上可操作地连接至第一转基因并且在相反方向上可操作地连接至第二转基因，其中该hCMV-rhCMV启动子包含：

(i) 增强子，侧翼是

(ii) 在增强子一侧的人巨细胞病毒主要立即早期启动子（hCMV启动子），以及

(iii) 在增强子另一侧的猕猴巨细胞病毒主要立即早期启动子（rhCMV启动子），其中

(iv) 第一转基因位于hCMV启动子的下游，并且

(v) 第二转基因位于rhCMV启动子的下游，其中该增强子是人巨细胞病毒主要立即早期增强子（hCMV增强子）。

2.如权利要求1所述的重组核酸分子，其中该第一和第二转基因是不同的并且它们中的至少一种编码抗原。

3.一种重组载体，该重组载体包含根据权利要求1或2所述的重组核酸分子。

4.一种重组病毒，该重组病毒包含根据权利要求1或2所述的重组核酸分子。

5.根据权利要求3所述的重组载体，其中该载体是质粒载体。

6.根据权利要求4所述的重组病毒，其中该病毒是腺病毒。

7.根据权利要求6所述的重组病毒，其中该腺病毒在E1区域具有缺失。

8.根据权利要求6或7所述的重组病毒，其中该腺病毒是人腺病毒血清型35或人腺病毒血清型26。

9.一种产生遗传稳定的重组腺病毒的方法，该重组腺病毒包含当该腺病毒感染靶细胞时各自被有效地表达的第一和第二转基因，该方法包括：

a) 制备包含如权利要求1所述的包含双向hCMV-rhCMV启动子的重组核酸分子的构建体，该双向hCMV-rhCMV启动子在一个方向上可操作地连接至第一转基因并且在相反方向上可操作地连接至第二转基因；并且

b) 将所述构建体并入该重组腺病毒的基因组中。

10.根据权利要求9所述的方法，其中该重组腺病毒在其基因组的E1区域具有缺失。

11.根据权利要求9所述的方法，其中该第一和第二转基因是不同的并且它们中的至少一种编码抗原。

12.根据权利要求9所述的方法，其中该重组腺病毒是人腺病毒血清型35或人腺病毒血清型26。

13.一种用于在细胞中表达至少两种转基因的方法，该方法包括向体外或离体细胞提供根据权利要求3-8中任一项所述的重组载体或重组病毒。

14.根据权利要求3-8中任一项所述的重组载体或重组病毒在制备用于诱导针对至少两种抗原的免疫应答的药物组合物的用途。

15.一种重组DNA分子，该重组DNA分子包含根据权利要求6-8中任一项所述的重组病毒的基因组。

16.一种药物组合物，该药物组合物包含根据权利要求3-8中任一项所述的重组载体或重组病毒以及药学上可接受的载体或赋形剂。