[发明专利]用于产生具有毛囊、皮脂腺和毛孔的人工皮肤的方法

说明书

[技术问题]本发明解决了提供具有毛囊、皮脂腺和毛孔的人工皮肤的问题。[技术方案]提供了用于产生具有毛囊、皮脂腺和毛孔的人工皮肤的方法，所述方法的特征在于包括以下步骤：(A)制备具有真皮层和表皮层的人工皮肤或仅具有真皮层的人工皮肤的步骤；以及(B)将分离的毛囊移植到步骤(A)中制备的人工皮肤的步骤，其中所述分离的毛囊各自具有皮脂腺，并且以这样的方式将分离的毛囊移植到所述人工皮肤，使得所述人工皮肤的真皮层的表面与毛囊的毛孔部的位置彼此对齐。

技术领域

本发明涉及用于制造人工皮肤的方法，以及通过所述方法制造的人工皮肤。

背景技术

近年来，考虑到动物保护，在欧洲各地已经促进开发废除动物实验并且用替代动物实验的方法进行药物和化妆品的药物效果和安全性评价的技术。此外，近年来，由于开发用于人工增殖从活对象取出的细胞的细胞培养技术中的进展，已经可以在保持多种器官或组织的生理功能的同时进行离体培养。因此，已经开发了使用人源培养细胞的多种测试评价方法，并且通过采用这些替代评价方法，还已经可以研究候选药物物质如何影响人体或者什么剂量将发挥期望作用或不利作用。此外，已经促进开发通过组合培养细胞、细胞骨架和培养基来制造人工皮肤的方法，并且其由Dr.H.Green的具有与天然皮肤相当的功能和结构的三维培养皮肤的发明引发，皮肤病学领域一直是开发替代动物实验的方法的开创者。迄今为止，还已提出人工皮肤的开发和生产，以及使用人工皮肤的替代动物实验的方法，以在没有实验室动物的情况下在皮肤上对药物和化妆品进行药物效果和安全性评价(例如，专利文献1)。

由表皮和真皮组织以及皮下组织构成的皮肤是一个大器官，其完全覆盖体表并且使身体内部与外界隔离开。皮肤分布有多种外胚层器官，例如毛囊、皮脂腺和汗腺，并且体被系统(皮肤器官系统)通过这些的结构和功能协作来构造。体被系统通过长出毛发来使体表抵御多种外部入侵，通过分泌皮脂和汗液来调整体表环境或排泄废物，并且还通过也与其他器官系统例如循环系统和神经系统合作来进一步承担各种生理功能，例如体温调节和感觉接收。由于通过皮肤附属物分泌到皮肤表面上的多种水溶性和亲脂性组分改变表皮层的物质渗透性和含水量，所述表皮层是刚性角质化复层上皮，因此提出了与变应性疾病的联系或与衰老相关的美学变化。

然而，迄今为止提出的人工皮肤简单地仅包含没有皮肤附属物的表皮层和真皮层，或者即使其包含皮肤附属物样结构(例如毛囊样结构)也不能再现正常的皮肤结构和功能。由于在没有功能性皮肤附属物的人工皮肤中不存在皮脂等的皮肤屏障功能，因此其作为实验室动物的替代物的用途受到限制。

例如，专利文献1显示，通过覆盖和培养包含收缩细胞(例如成纤维细胞)的胶原蛋白基质层和包含构成组织附属物的细胞(例如毛乳头细胞)的胶原蛋白基质层，可以在培养物中产生毛囊样结构。然而，专利文献1仅显示产生具有毛囊的类似外部形式的结构，并且未显示再现皮肤附属物的正常结构和功能的人工皮肤。

引用列表

专利文献

[专利文献1]日本公布未审查专利申请公布No.H10-136977

发明概述

本发明解决的问题

本发明的目的是提供具有毛囊、皮脂腺和毛孔的人工皮肤。

解决问题的手段

作为本发明人为了制造可再现动物皮肤屏障功能的人工皮肤而进行的广泛研究的结果，我们成功地制造了具有功能性皮肤附属物的人工皮肤。

换言之，在一个实施方案中，本发明涉及用于制造具有毛囊、皮脂腺和毛孔的人工皮肤的方法，特征在于，其包括以下每个步骤：

(A)：制备具有真皮层和表皮层的人工皮肤或仅具有真皮层的人工皮肤的步骤；以及

(B)：将分离的毛囊移植到步骤(A)中制备的人工皮肤的步骤；

其中：