[发明专利]用于病毒抗原的血清学检测的方法

说明书

本发明涉及检测来自受试者的样品中丙型肝炎病毒（HCV）的核心多肽的方法，包括：（a）使所述样品与碱并与包含阳离子去污剂的表面活性剂接触，和（b）检测所述样品中所述HCV的核心多肽。本发明进一步涉及预处理来自受试者的样品以用于检测HCV的方法，包括使所述样品与碱并与包含阳离子去污剂的表面活性剂接触；且涉及用于检测样品中HCV的预处理试剂，包含碱和包含阳离子去污剂的表面活性剂，其中所述表面活性剂进一步包含非离子型去污剂。此外，本发明进一步涉及与本发明方法有关的试剂盒、用途和设备。

发明领域

本发明涉及检测来自受试者的样品中丙型肝炎病毒（HCV）的核心多肽的方法，所述方法包括（a）使所述样品与碱并与包含阳离子去污剂的表面活性剂接触，和（b）检测所述样品中所述HCV的核心多肽。本发明进一步涉及预处理来自受试者的样品以用于检测HCV的方法，包括使所述样品与碱并与包含阳离子去污剂的表面活性剂接触；且涉及用于检测样品中HCV的预处理试剂，包含碱和包含阳离子去污剂的表面活性剂，其中所述表面活性剂进一步包含非离子型去污剂。此外，本发明进一步涉及与本发明方法有关的试剂盒、用途和设备。

相关技术

丙型肝炎病毒（HCV）是黄病毒科（Flaviviridae）丙型肝炎病毒属（Hepacivirus）的小的有包膜病毒，包含+-链单链RNA作为基因组。在HCV颗粒中，核心蛋白与RNA基因组缔合，形成衣壳样结构，其被包含病毒糖蛋白E1和E2的膜包围。HCV包括至少六种或七种基因型，并被鉴定为也称为非甲非乙型肝炎的丙型肝炎的病原体。

HCV感染的诊断通常在血液衍生的样品中进行，一般免疫学检测病毒核心蛋白或检测抗-HCV抗体或两者，或通过PCR检测病毒基因组。用于检测HCV并且特别是用于检测HCV核心多肽的免疫测定中的通常重要的方面是提供高度灵敏且高度特异性的测试，其在感染后的所有阶段可靠地检测感染的样品，同时错误结果例如假阳性的数目应保持尽可能小。此外，对干扰的敏感性也是不期望的，这是因为这经常导致不清楚或错误的结果，这使得进一步昂贵且耗时的调查成为必要。本领域中使用的免疫学方法包括在有去污剂和/或离液剂的情况下的酸性或中性处理的各种组合（EP 0 967 484 A1、EP 1 020 727 A1、EP 1691198 A1），或在碱性pH用离液剂处理样品或从其沉淀的病毒（JP 1999178174A；EP 2 327987 A2；Tanaka等人（1995)，J Hepatol 23：742），旨在分解病毒颗粒以增加测定的灵敏度。出于相同目的，还使用高盐浓度（EP 1 083 428 A2）。然而，酸处理引起可逆变性，这可以允许病毒颗粒的至少部分重装配。此外，来自血液样品的潜在混杂的免疫球蛋白也可能复性，并因此不能有效地除去。

要解决的问题

因此，本发明的目的是提供用于检测HCV的改进的手段和方法，其至少部分地避免了现有技术的缺点，特别是在增加特异性和/或降低对干扰的敏感性方面。

发明概述

通过具有独立权利要求的特征的本发明的手段和方法解决了该问题。在从属权利要求中列出了可以以孤立方式或以任何任意组合实现的优选实施方案。

因此，本发明涉及检测来自受试者的样品中丙型肝炎病毒（HCV）的核心多肽的方法，所述方法包括：

（a）使所述样品与碱并与包含阳离子去污剂的表面活性剂接触，和

（b）检测所述样品中所述HCV的核心多肽。

如下文所使用的，术语“具有”、“包含”或“包括”或其任何任意语法变化形式以非排他的方式使用。因此，这些术语既可以指除了由这些术语引入的特征之外在该上下文中描述的实体中不存在另外的特征的情况，又可以指其中存在一个或多个另外的特征的情况。作为示例，措辞“A具有B”、“A包含B”和“A包括B”可以既指除了B之外，A中不存在其他要素的情况（即，A完全且排他地由B组成的情况），又指除了B之外，在实体A中存在一个或多个另外的要素的情况，例如要素C、要素C和D或甚至另外的要素。