[发明专利]使用流式细胞术散射波形分析进行样品之间的空气气泡检测的方法

说明书

本文提供了在流体流动物料流中检测分离气体的方法。在一个示例中，随着多个经气体分离的样品的流动物料流穿过流式细胞仪，由流式细胞仪的散射检测器生成电压输出信号。对电压输出信号进行采样，并且对于大于分离间隙阈值的电压输出信号的每个采样电压，记录时间戳和电压值。在一些示例中，分离间隙阈值是样品的最大电压输出的至少两倍。还描述了包含被配置用于执行这些方法步骤的软件的流式细胞术系统。

相关申请

本发明要求于2016年6月7日提交的名称为“使用流式细胞术前向散射波形分析进行样品之间的空气气泡检测的方法”的美国临时申请No.62/346,739的优先权的权益，其内容据此通过引用以其整体并入本文。

技术领域

本发明涉及一种在流体流动物料流中检测分离气体的方法。

背景技术

高通量流式细胞术系统使用泵系统来用离散样品颗粒悬浮液的物料流填充样品管线，其中离散样品颗粒悬浮液的物料流被从微孔板的孔中吸出并通过空气气泡间隙被彼此分离。将整个样品物料流连续地输送至流式细胞仪，以获取来自微孔板中所有样品的数据并将其存储在单个数据文件中。在数据采集期间，还记录高分辨率时间参数。由空气间隙的通过来在数据流中创建颗粒检测中的时间间隙，以允许在结合时间参数绘制时区分并单独评价各个颗粒悬浮液。基于这种时间分布，识别数据峰并将其分配给微孔板的各个孔。然而，在许多情况下，这些时间分布不足以准确地识别各个样品孔，并且有时会发生识别错误。

发明内容

本文中公开了用于在由空气气泡分离的连续流动的样品物料流中检测空气气泡的方法和系统。在一个示例中，使用流式细胞仪的散射检测器的散射波形输出来检测空气气泡。

本公开的一些实施方式提供了用于如下的方法：随着包含多个样品的流动物料流穿过流式细胞仪一段时间，采用散射检测器生成电压输出信号，每个样品被分离气体分离；对电压输出信号进行采样；并对于大于分离间隙阈值的电压输出信号的每个采样电压，记录时间戳和电压值。本方法还可以包括如下步骤：在生成步骤之前，将包含颗粒的多个样品移动到流动物料流中；将分离气体插入到所述多个样品中的相邻样品之间，以使所述样品在所述流动物料流中彼此分离，从而所述流动物料流构成经气体分离的样品流动物料流；将包含分离的样品和分离流体的所述经流体分离的样品流动物料流引导到流式细胞仪并引导穿过流式细胞仪；并且随着流体流动物料流穿过流式细胞仪，连续操作流式细胞仪，以使经气体分离的流动物料流集中并通过散射检测器检测散射光。在另一个实施方式中，本方法可以包含如下步骤：在移动步骤之前，从具有多个样品孔的板获得多个样品，其中多个样品的每个样品是从多个孔的相应孔获得的。

本公开的实施方式还包括非暂时性计算机可读介质，在其中存储有可被执行以使处理器执行本文中所描述的方法的指令。

本公开的其他实施方式包括一种系统，其包含：包含散射检测器的流式细胞仪；处理器，其与所述散射检测器的输出通信；以及，非暂时性计算机可读介质，在其中存储有可被执行以使处理器执行本文中所描述的方法的指令。

附图说明

图1A是流式细胞术装置的示意图。

图1B是图1A的流式细胞术装置的导管中紧邻的样品的横截面示意图。

图2示出了来自前向散射检测器的样品事件波形输出的示例图。

图3示出了来自前向散射检测器的空气气泡间隙波形输出的示例图。

图4示出了采用从流式细胞仪的前向散射检测器获取的分离气体计时输出数据作图的，从流式细胞仪获取的如下的样品事件数据的示例性直方图：预板(pre-plate)装填(prime)空气气泡、具有行间振动的样品板的第一行A和样品板的B行的前两个孔。

图5是图4的一部分的放大视图。

图6是图4的一部分的放大视图。