[发明专利]新表位RNA癌症疫苗

说明书

本发明涉及包含多核苷酸或多肽的抗癌疫苗、其中使用这种抗癌疫苗治疗癌症的方法以及用于产生所述疫苗的方法。所述疫苗包含含有核苷酸序列的多核苷酸，所述核苷酸序列编码靶向单元、二聚单元、第一接头和抗原单元，其中所述抗原单元包含n‑1个抗原亚单元，每个亚单元包含癌症新表位序列的至少一部分和第二接头且所述抗原单元还包含最终癌症新表位序列，其中n为3至50的整数，或所述疫苗包含由所述多核苷酸编码的多肽或由两个多肽组成的二聚蛋白，这两个多肽是由所述多核苷酸编码。

发明领域

本发明涉及一种包含新表位多核苷酸或多肽的抗癌疫苗、其中使用这种抗癌疫苗治疗癌症的方法以及用于产生所述疫苗的方法。

发明背景

虽然癌症的治疗在过去几十年间已有改善，尤其归因于早期检测和诊断，这显著地延长了存活期，仅约60％诊断为癌症的患者在诊断后的5年内仍活着。

大多数在用的癌症治疗是手术操作、放射线和细胞毒性化疗剂，然而，它们都有严重的副作用。近来还使用了利用针对已知癌症相关抗原的抗体的治疗。

在最近几年间，借助于患者自己的免疫系统靶向癌细胞的癌症免疫疗法(即癌症疫苗)已引起了人们的关注，因为这种疗法可减少或甚至消除传统癌症治疗中所见的一些副作用。

免疫学的基础是基于自身-非自身辨别。诱导感染性疾病的大多数病原体含有可由宿主识别并触发免疫应答的分子签名，然而，肿瘤细胞来源于正常细胞，并且通常不表达任何分子签名，使得它们更难以与正常细胞区分

然而，大多数肿瘤细胞表达不同类别的肿瘤抗原。一类肿瘤抗原是所谓的肿瘤相关抗原，即在正常组织中以低水平表达且在肿瘤组织中以高得多的水平表达的抗原。近十年来，这种肿瘤相关抗原成为了癌症疫苗的靶标。然而，针对肿瘤相关抗原的免疫治疗存在的几个问题在于，肿瘤细胞可通过所讨论的抗原的下调而逃避免疫系统，且该治疗还可由于正常细胞破坏而产生毒性。

近来，已鉴别了另一类肿瘤抗原，即所谓的肿瘤新抗原或肿瘤特异性抗原。肿瘤新抗原是由于肿瘤基因组中的一个或多个突变而出现，所述突变在所讨论的蛋白质的氨基酸序列中产生变化。由于在正常组织中不存在这些突变，所以针对肿瘤相关抗原的治疗的副作用在用针对肿瘤新抗原的免疫治疗时并不出现。

体细胞的、肿瘤特异性非同义突变的平均数目对于恶性黑色素瘤来说介于100与120之间。一些基因改变可由免疫系统识别，代表理想的抗原。动物模型已证实了肿瘤新抗原的免疫效用，并且已经开始了两个临床试验，一个是用包含高达10个突变蛋白质的疫苗，而另一个是用RNA疫苗(IVAC MUTANOME)。RNA疫苗包含2个RNA分子，每个包含五个不同的突变编码序列。

然而，通过施用几种不同蛋白质或几个RNA序列，难以控制针对所施用的或在体内表达的各种蛋白质的免疫应答。

因此，需要一种更高效的疫苗，其确保突变蛋白质在体内或体外的表达并且确保抗原的递送以及引发强T细胞应答所需的抗原呈递细胞的活化。

发明内容

本发明涉及一种抗癌疫苗，所述疫苗涉及来自肿瘤新抗原的多个新表位。由此获得特异性地靶向所鉴别的肿瘤抗原的个性化新抗原疫苗。

一方面，本发明涉及一种包含免疫有效量的多核苷酸的治疗性抗癌疫苗，所述多核苷酸包含编码抗原单元的核苷酸序列，所述抗原单元包含

-2至50个抗原亚单元，每个亚单元包含癌症新表位序列的至少一部分和接头

-最终的癌症新表位序列。

在一个优选实施方案中，接头是柔性接头。优选的是，所述接头是非免疫原性的。在另一优选实施方案中，所述接头在所有抗原亚单元中是相同的。

接头优选是丝氨酸-甘氨酸接头。