[实用新型]一种用于外泌体分离提取的试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种用于外泌体分离提取的试剂盒，属于细胞生物学领域。

背景技术

外泌体(exosome)是由细胞经过一系列调控过程而形成，并可分泌至胞外的分子直径为30-100nm的亚细胞双层膜囊泡，可以通过质膜受体直接激活受体细胞，也可以转运蛋白质、核酸甚至细胞器进入受体细胞内，从而在生理学和病理学上都发挥重要作用。

目前常用的外泌体提取方法主要包括超速离心法、免疫磁珠法、超滤离心法、聚乙二醇(Polyethylene glycol，PEG)沉淀法等。超高速离心机造价昂贵，对设备要求高，并且高速离心可能破坏外泌体的结构，从而降低其质量；免疫磁珠法获得的外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响，不利于下游实验；PEG沉淀法所得外泌体存在纯度和回收率低、杂蛋白较多等问题；超滤离心法简单高效，且不影响外泌体的生物活性，但其本身难以对外泌体进行富集。

实用新型内容

为了解决上述技术问题，本实用新型的目的是提供一种结构简单、操作方便的外泌体分离提取的试剂盒。

为达到上述目的，本实用新型提供了一种用于外泌体分离提取的试剂盒，包括盒体和盒盖，其中，所述盒体内设置有沉淀溶液试剂瓶放置区、缓冲溶液试剂瓶放置区、微孔滤膜放置区、超滤离心管放置区。

优选地，该试剂盒至少包含两个沉淀溶液试剂瓶放置区，用于放置第一沉淀溶液试剂瓶和第二沉淀溶液试剂瓶；所述第一沉淀溶液试剂瓶用于盛装高浓度PEG溶液，所述第二沉淀溶液试剂瓶用于盛装低浓度PEG溶液。所述高浓度PEG溶液的浓度可以为16％(质量体积浓度)。高浓度PEG溶液在使用时与经离心和过滤的细胞培养上清液等体积混合，用于沉淀和聚集外泌体。所述低浓度PEG溶液的浓度可以为5％(质量体积浓度)。低浓度PEG溶液用于重悬经高浓度PEG溶液提取的包含外泌体的沉淀，对其进行进一步纯化。所述PEG溶液采用的PEG为PEG 6000。

优选地，所述第一沉淀溶液试剂瓶和第二沉淀溶液试剂瓶的体积为100ml。

优选地，该试剂盒至少包含一个缓冲溶液试剂瓶放置区，该缓冲溶液试剂瓶放置区设有盛装PBS溶液的缓冲溶液试剂瓶。

优选地，所述缓冲溶液试剂瓶的体积为100ml。

优选地，该试剂盒至少包含一个用于放置微孔膜的微孔滤膜放置区。所述微孔滤膜放置区用于放置微孔滤膜，所述微孔滤膜放置区可以放置10张以上的微孔滤膜，即所述微孔滤膜的数量至少为10张。

优选地，所述微孔滤膜的孔径为0.22μm。

优选地，该试剂盒包含一个超滤离心管放置区，该超滤离心管放置区包括至少10个用于放置超滤离心管的盛装孔。

优选地，所述超滤离心管的体积为4ml。

优选地，所述超滤离心管为截留分子量为100kD的超滤离心管。

本实用新型中，PEG溶液对外泌体具有富集的作用，两种浓度的PEG溶液可对外泌体进行两次富集，提高外泌体密度；所述微孔滤膜可以过滤除去较大的细胞碎片等物质；所述离心超滤管可以除去粒径较小的物质；所述PBS溶液可用于重悬沉淀物质，并最终重悬外泌体。

该试剂盒为外泌体的分离提取提供了一种方便的技术方案，无需进行超速离心，就可以获得经PEG富集、超滤纯化的外泌体，操作简便，提高外泌体密度和纯度。

附图说明

图1为实施例1中用于外泌体分离提取的试剂盒在开启状态下的盒体结构示意图。

主要附图标号说明：

1-盒体、2-高浓度PEG溶液瓶放置区、3-低浓度PEG溶液瓶放置区、4-PBS溶液瓶放置区、5-微孔滤膜放置区、6-超滤离心管放置区

具体实施方式

为了对本实用新型的技术特征、目的和有益效果有更清楚的理解，现参照说明书附图对本实用新型的技术方案进行以下详细说明，但不能理解为对本实用新型的可实施范围的限定。

实施例1

本实施例提供了一种用于外泌体分离提取的试剂盒，其包括以下结构：

参照图1，所述试剂盒包括盒体1、高浓度PEG溶液瓶放置区2、低浓度PEG溶液瓶放置区3、PBS溶液瓶放置区4、微孔滤膜放置区5、超滤离心管放置区6。在本实施例中，高浓度PEG溶液瓶放置区2用于放置盛装浓度为16％的PEG溶液的试剂瓶、低浓度PEG溶液瓶放置区3用于放置盛装浓度为5％的PEG溶液的试剂瓶、PBS溶液瓶放置区4用于放置盛装PBS溶液的试剂瓶、微孔滤膜放置区5用于放置10张微孔滤膜、超滤离心管放置区6用于放置10个超滤离心管。