[实用新型]一种甲硝唑免疫胶体金快速检测试剂卡

说明书

技术领域

本实用新型属于免疫胶体金快速检测领域，具体涉及一种甲硝唑免疫胶体金快速检测试剂卡。

背景技术

甲硝唑化学名为2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇，属于硝基咪唑类抗菌药，具有抗厌氧菌和抗原虫的作用，主要用于治疗鸡、火鸡组织滴虫病、牛毛滴虫病，还可与其它抗生素联合，用于治疗厌氧菌感染。此外，该类药物还能促进牛、猪等动物的生长，常被用作饲料药物添加剂。因而极易造成动物源性食品中甲硝唑的残留。研究表明，甲硝唑对人体有多种毒副作用，包括消化系统、神经系统、心血管系统、皮肤症状、泌尿系统等的毒副作用。此外，甲硝唑还具有潜在的致癌作用。

为了食品安全，各国都出台了相应政策，1998年，欧盟禁止甲硝唑用于动物食品；2002 年，美国FDA禁止在进口动物源性食品中使用甲硝唑及其它硝基咪唑类药物；2003年，加拿大禁止所有5-硝基咪唑类化合物作为兽药在食品中使用；2002年，我国农业部第236号公告规定，在食源性动物中禁用甲硝唑。尽管如此，动物源性食品中甲硝唑残留事件时有发生，因此，检测动物源性食品、饲料中甲硝唑的含量对保障食品质量安全具有重要意义。

当前，食品中甲硝唑残留的检测方法主要有高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、加压毛细血管法、碳糊电极法、酶联免疫分析法等。虽然上述方法灵敏度高、准确性好，能够定量检测食品中甲硝唑的残留量，但是对实验设备及操作人员的要求高，不适用于现场快速检测。

实用新型内容

本实用新型提供一种现场快速检测甲硝唑的免疫胶体金试剂卡可用于检测甲硝唑的残留，检测样品可为蜂产品、水产品、鸡蛋、奶制品等。本实用新型试剂卡灵敏度高、特异性好、重复性好、检测时间短，适用于现场快速检测。

本实用新型试剂卡包括底板和塑料卡套，其特征在于所述底板由PVC板，以及依次黏贴在PVC板上的样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜、吸水材料垫组成，所述样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜、吸水材料垫首尾均有1～2mm的重叠，所述硝酸纤维素膜从样品垫到吸水垫依次喷有相距5～6mm并与胶体金结合垫平行的检测线和控制线，所述检测线上包被有甲硝唑-牛血清白蛋白偶联物，所述控制线上包被羊抗鼠IgG。

进一步，塑料卡套正面设置有加样孔与观察区，所述加样孔呈漏斗状，所述塑料卡套内具有固定底板的凹槽，通过卡槽与卡突结合来固定底板。

进一步，加样孔对应的是底板上的样品垫，观察区对应的是底板上的硝酸纤维素膜，所述加样孔与观察区的长度与宽度分别略小于样品垫和硝酸纤维素膜。

进一步，样品垫由玻璃纤维制成，胶体金结合垫由玻璃纤维或聚酯膜制成，吸水材料垫为滤纸。

进一步，胶体金结合垫上包被有抗甲硝唑单克隆抗体-胶体金结合物。

本实用新型试剂卡利用抗体免疫竞争原理，通过抗原与金标抗体的显色反应特异性检测样品中甲硝唑的残留。当样品溶液中有甲硝唑残留时，甲硝唑先与胶体金颗粒上的特异性抗体结合。因此当胶体金颗粒随样品扩散至检测线时，由于胶体金颗粒上特异性抗体的活性位点被样品中的甲硝唑占据而无法与检测线上甲硝唑特异性抗原结合；当样品中甲硝唑残留量超出试剂卡的检出限时，检测线显色较控制线浅或者不显色，判断结果为阳性。当样品中甲硝唑残留量低于试剂卡检出限时，检测线显色较控制线深，判断结果为阴性。

本实用新型试剂卡各部分作用如下：

样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜、吸水材料垫首尾均有部分重叠可以做到更快速的层析。

检测线与控制线与胶体金结合垫平行可以使样品在层析过程中充分与检测线、控制线上的抗原/抗体反应，实验结果显示更明显。

加样孔呈漏斗状可以防止加样过程中样品液溅出而影响实验结果。

加样孔的长度和宽度略小于样品垫可以放置样品溶液滴出样品垫外，观察区的长度和宽度略小于硝酸纤维素膜可以防止外部杂质进入卡套腔内，并固定硝酸纤维素膜。

本实用新型具有如下有益效果：

(1)高灵敏度。本实用新型对蜂蜜中甲硝唑检出限为1μg/kg，在同类检测中达到了较优水平。

(2)高特异性。本实用新型以胶体金标记高亲和力的单克隆抗体为基础制备而成，对甲硝唑的交叉反应率为100％，具有高度专一性。

(3)操作简单快速。本实用新型操作简单且不依赖大型试验设备，滴样后3-5min即可用肉眼判断硝酸纤维素膜上的检测线和控制线颜色的深浅来读取结果。

(4)成本低。本实用新型生产工艺简单，流程成熟。生产成本低，投资少，收效快。

附图说明