[实用新型]一种基于适配体和氧化石墨烯的β‑内酰胺酶检测试纸

说明书

技术领域

本实用新型公开了一种β-内酰胺酶检测试纸，具体地说，是一种基于适配体和氧化石墨烯的β-内酰胺酶检测试纸。

背景技术

β-内酰胺酶是细菌产生的可水解β-内酰胺类抗生素的酶，由于β-内酰胺酶可以水解青霉素及头孢类等抗生素，所以被不法分子作为解抗剂非法添加到食品或食品原料(例如牛奶和生乳)中，从而达到掩蔽抗生素的目的，影响抗生素残留检测。出于经济利益的驱动，国内一些不法奶站人为的使用β-内酰胺酶等生物制剂来降解牛乳中残留的抗生素，生产人造“无抗奶”。如胡科锋等在广州市抽取4个品牌不同包装的牛奶20份进行检测，8个样品检出β-内酰胺酶，检出率40％；沈阳疾病预防控制中心马景宏等从沈阳各超市随机采集7个品牌不同的乳制品50份，利用杯碟法对市售牛奶中残留的β -内酰胺酶进行检测，结果显示：7个品牌的乳制品样品50份中共有4大品牌19份样品(38％)检测结果为阳性，此种类似报道还有很多，由此可见β- 内酰胺酶的滥用情况非常普遍。长期食入非法添加β-内酰胺酶的奶制品，一方面会增加人体内细菌的耐药性，降低甚至完全抵消抗生素类药物的疗效，此外还会使过敏体质的人出现荨麻疹、发热、甚至过敏性休克等危害；另一方面在分解抗生素后，可能引进其它有害物质(如：青霉噻唑酸等)。正因为上述潜在的危害性，中国食品整治办于2009年2月4日在《食品中可能违法添加的非食用物质名单(第二批)》中明确将β-内酰胺酶列入非食用物质，要求进行全国性监控，特别是要开展奶站和乳品企业整顿，严厉打击奶畜养殖违规添加“解抗剂”(β-内酰胺酶)的违法行为。

氧化石墨烯薄片是石墨粉经化学氧化及剥离后的产物，氧化石墨烯是单一的原子层，可以随时在横向尺寸上扩展到数十微米，因此，其结构跨越了一般化学和材料科学的典型尺度。氧化石墨烯可视为一种非传统型态的软性材料，具有聚合物、胶体、薄膜，以及两性分子的特性。氧化石墨烯长久以来被视为亲水性物质，因为其在水中具有优越的分散性，但是，相关实验结果显示，氧化石墨烯实际上具有两亲性，从石墨烯薄片边缘到中央呈现亲水至疏水的性质分布。因此，氧化石墨烯可如同界面活性剂一般存在界面，并降低界面间的能量。

β-内酰胺酶种类繁多，迄今已发现400多种。其分类方法主要有分子生物学方法和BUSH法。分子生物学法根据氨基酸序列将酶分为A、B、C、D四类。其中A、C、D类酶以丝氨酸(Ser)为酶的活性作用位点，而B类酶以金属离子为活性作用位点。BUSH法根据底物及抑制剂谱将其进行分类。目前，奶牛养殖中牛乳腺炎是奶牛的第一高发病，治疗该病的首选药物是青霉素，而青霉素也就成为了牛奶中最常见的残留抗生素。因此，市场上出售的用于水解牛奶中抗生素的β-内酰胺酶制剂，主要为对青霉素有特效分解作用的种类。

由于β-内酰胺酶对人体的潜在危害，开发针对它的快速有效的现场检测技术是刻不容缓的工作。目前，对乳及乳制品中β-内酰胺酶的检测方法主要有微生物法、杯碟法、头孢硝基噻吩显色法、酸度法、碘量法、高效液相色谱法等，其中微生物法和碘量法是最常用的检测方法。上述方法除HPLC 法以外，都是采用化学显色的间接法来检测抗生素底物或水解产物的变化，间接推导出β-内酰胺酶含量，此类方法不够灵敏，干扰因素较多，结果易受到影响。而色谱法需要大型仪器和复杂的样品前处理，不利于现场检测使用和推广。

实用新型内容

本实用新型的目的在于提供一种基于适配体和氧化石墨烯的β-内酰胺酶检测试纸，该检测试纸检测速度快，检测方法简单，检测结果可靠。

本实用新型的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种基于适配体和氧化石墨烯的β-内酰胺酶检测试纸，包括底板，所述的底板上玻璃纤维，玻璃纤维设有核酸适配体和氧化石墨烯复合层，所述玻璃纤维的两个端部均设有吸水纸，核酸适配体和氧化石墨烯复合层上部覆盖有保护膜，在底板的两个侧边分别设有一挡板。

进一步的，上述的基于适配体和氧化石墨烯的β-内酰胺酶检测试纸，所述吸水纸与核酸适配体和氧化石墨烯复合层两端交叠粘贴。

进一步的，上述的基于适配体和氧化石墨烯的β-内酰胺酶检测试纸，所述底板的长度为4.0cm，宽度为0.8cm；所述硝酸玻璃纤维的长度为2.5cm，宽度为0.7cm；所述的吸水纸的长度为0.9cm，宽度为0.8cm.

进一步的，上述的基于适配体和氧化石墨烯的β-内酰胺酶检测试纸，所述酸适配体和氧化石墨烯复合层是将羧基荧光素修饰的β-内酰胺酶的核酸适配体加入到氧化石墨烯溶液中混匀，涂覆在玻璃纤维上，干燥后形成的核酸适配体和氧化石墨烯复合层。